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黄曲霉毒素M1ELISA检测试剂盒说明
检测黄曲霉毒素M1ELISA检测试剂盒的说明及注意事项
服务类别:其他生物研发总访问:4575
最后更新:2021-10-14半年访问:9
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【检测步骤】
测定前须知:
1.      使用之前将所有试剂和所需板条回温(20~25℃)。
2.      使用之后立即将所有试剂及剩余的板条放置2~8℃。
3.      ELISA分析中的再现性,很大程度上取决于洗板的一致性,正确的洗板操作是ELISA操作中的要点。
4.      在所有的恒温孵育过程中,避免光线照射,用盖板膜封住微孔板。
二、操作步骤:
1.        将所需试剂从微孔板中取出,放置室温(20~25℃)30min以上,液体试剂使用前均须摇匀。
2.        取出所需数量的微孔板,将不用的微孔板与干燥剂一起重新真空密封,保存于2~8℃。不要冷冻。
3.        洗涤工作液在使用前也需回温。
4.        将样本和标准品对应微孔编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5.        加标准品/样本50ml到对应的微孔中,加入酶标物50ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。
6.        小心揭开盖板膜,用洗涤工作液充分洗涤300ml/孔, 洗板5次,每次间隔30s,用吸水纸拍干。
7.        加入显色液100ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境反应30min。
8.        加终止液50ml/孔,轻轻振荡混匀,设酶标仪于450nm处读每孔OD值。
 

 

【注意事项】
1.        室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2.        在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3.        每种试剂使用前均需摇匀。
4.        反应终止液为2M盐酸,避免接触皮肤。
5.        不要使用过了有效期的试剂盒;也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6.        储存条件:
试剂盒保存于2~8℃,不要冷冻,将不用的微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感,因此要避光保存。
7.        试剂变质的迹象:
显色试剂有任何颜色表明显色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
8.        加入显色液后,一般显色时间为15~30min。若颜色较浅,可延长反应时间到35min(或更长),但不得超过40min。反之,则减短反应时间。
9.        该试剂盒最佳反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
 
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