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蛋白瞬时表达(TEG)
本公司为你提供蛋白瞬时表达(TEG),通过使用哺乳动物细胞TGE快速制备r-蛋白,能提供毫克(mg)级至克(g)r-蛋白。
服务类别:其他生物研发总访问:1745
最后更新:2010-3-17半年访问:26
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  1. (TGE) 瞬时表达
    • 稳定基因表达是将重组基因插入寄主基因组中,但鉴定及检测重组细胞系是个耗时、昂贵的过程,因此一些客户,尤其是转包合同或需大规模制备最优化细胞系的客户选择快速制备r-蛋白,快速蛋白制备(能提供mg(毫克)级至g(克)级)通过使用哺乳动物细胞TGE满足这些客户的需求。与稳定基因表达相比,TGE主要用于短期内制备r-蛋白,一般在10天内即可快速转染,无需质粒DNA的遗传性选择。我们的瞬时表达使用悬浮细胞,能轻松表达毫升至100L的蛋白。适合的表达载体构建完成四周左右,我们就能交付给客户表达产物:细胞培养液收集物或重组蛋白。如果客户需要,金斯瑞能将客户的目的基因,克隆入专为TGE系统所设计的高效表达载体中。
 
  1. 工艺过程开发及扩大规模
    • 金斯瑞能优化表达过程以及表达的产物,并能对增长率,转种率, cell mass细胞群, 以及更改条件,促进特异化生成并测定生产体积等等方面进行全面的分析。金斯瑞同样能按比例降低生产规模,预测细胞表达量。金斯瑞自主研发的特异性、高生产效率的表达系统,是提供给客户高通量生产的最佳保障。
    • 15N- 或13C-标签蛋白表达。
 
  1. 纯化
    • 蛋白表达后,我们会富集培养液,收集上清或细胞,进行蛋白纯化。金斯瑞常用蛋白纯化方式为亲和柱纯化,同时也提供凝胶过滤、离子交换及疏水层析等纯化方法。初步纯化的蛋白经特殊蛋白酶去除纯化标签后,通过凝胶过滤进一步进行纯化。
    • 15N- 或13C-标签蛋白表达。
 
  1. 蛋白鉴定
    • 每个订单完成后,我们的专家将确认金斯瑞交付的产品确实满足客户的需求。一般来说,金斯瑞会选取以下几个或全部检测方法鉴定表达的蛋白:染色后进行SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)或Native-PAGE(未变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)检测,蛋白浓度测定,Western blotting检测,吸收光谱检测,N末端序列测定,质谱分析,核磁共振波谱分析,以及活性检测,亲和层析,离子交换层析,凝胶过滤层析,疏水层析等方法纯化蛋白。
 
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