制备人鼠嵌合抗体及人源全长抗体

制备人鼠嵌合抗体及人源全长抗体

服务简介

● 人-鼠嵌合抗体：

人源单抗的生产在技术上难以克服融合率低、建株难、不稳定、产量低、人体不能随意免疫等问题。随着基因工程技术的崛起以及抗体分子遗传学的深入研究，应用基因工程技术该着现有优良的鼠单抗的基因，其着眼在于尽量减少抗体重的鼠源成分，但又尽量保留原有的抗体特异性，从而创造出新型抗体-基因工程抗体。1984年，Morrion，从杂交瘤细胞中分离出功能性可变区基因，与人Ig恒定区的基因连接，插入适当质粒，构建鼠-人嵌合的重链和轻链基因质粒载体，共同转染宿主细胞（如骨髓瘤细胞），表达鼠-人嵌合抗体。人-鼠嵌合抗体的特点是就是用人源性抗体的一部分代替鼠源性抗体的一部分，使之保留对抗原的特异性，又具备与补体和细胞结合的功能，并减少异源性蛋白的抗原性。此外，通过连接上不同的人恒定区基因而改变抗体的效应功能。要生产这样的嵌合抗体，第一步也是关键的一步是要从杂交瘤细胞中获得McAb的特定可变区基因，然后再与人的抗体恒定区基因连接，最后将构建好的人-鼠嵌合抗体基因导入骨髓瘤细胞中表达。主要步骤包括制备目的基因、选择载体、将目的基因和载体重组，然后将嵌合抗体的DNA重组体导入受体细胞，筛选阳性细胞和表达产物的鉴定。

● 人源化抗体（humanized antibody，HAb）

人源化抗体就是指抗体的可变区部分由人类可变区基因所编码，即Vh和Vl。人源化抗体可以大大减少鼠源抗体对人类机体造成的免疫副反应。制备人源化抗体的主要目的是减少抗体的异源性，以利其临床应用。

基因工程抗体的出现，极大地推动了抗体技术的发展和抗体药物及诊断试剂的研发。但是目前有相当数量的具有潜在应用价值的鼠源单抗以及小分子抗体（scFv等）无法进行人源改造及全长改造并开展进一步研究。

本中心成功建立了人鼠嵌合抗体及人源全长抗体改造系统。利用这一系统可以将您的鼠源单克隆抗体进行人源嵌合化改造，或将您的小分子抗体进行全长改造。

服务流程 （8个月）

项目服务	Cat.No.	报价
人鼠嵌合抗体制备	A21	￥50000起（询价）
人源全长抗体制备	A22	￥50000起（询价）

我实验室已建立了从基因克隆，载体构建到表达筛选、抗体制备及亲和力测定等一整套嵌合（全长）抗体制备流程。其技术路线为：
① 获得重轻链可变区，构建入含有人抗体恒定区的表达载体质粒。（2个月）
② 转染二氢叶酸还原酶（dhfr）缺陷型CHO细胞系，在选择压力下筛选并克隆获得稳定表达细胞株。　　（3个月）
③ 加压筛选表达效率最高的细胞株，制备纯化少量抗体并检测其亲和力、特异性等技术指标。（3个月）

提供成果

① 1-2株稳定表达细胞株。
② 各实验节点检测报告。（包括可变区基因测序报告，抗体活性ELISA检测报告，细胞株表达量ELISA检测报告，抗体亲和力ELISA或SPR检测报告，抗体特异性ELISA或western blot检测报告）

上海中科英沐生物科技有限公司（Shanghai Immune Biotech CO.,Ltd.）成立于2006年，是由中科院上海生命科学研究院发起并投资组建的生物高科技有限责任公司。
公司依托上海生命科学研究院强大的创新研发能力，旨在研究和开发具有国际水准的抗体产品（科研类、诊断类、治疗类），并为科研工作者提供高品质和全方位的技术服务。