GST下拉实验（GST-pull down assay）

原理简介

　　GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术，可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST（谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase）融合，使其与谷胱甘肽亲和树脂结合，然后在目的蛋白溶液过柱时，便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白，洗脱结合物后通过western blot分析，即可证实两种蛋白间的相互作用或筛选与之互作的蛋白。

实验流程

　　①构建表达载体：目的基因克隆或目的基因合成；限制性内切酶酶切骨架载体并纯化；目的基因插入骨架载体；转化大肠杆菌，筛选阳性克隆并测序鉴定；
　　②转化表达菌株：将目的表达载体转化表达菌株；
　　③制备目的蛋白：诱导目的蛋白表达并提取目的蛋白；
　　④GST-pull down实验；
　　⑤Western Blot检测目的蛋白；
　　⑥拍照记录实验结果。

　　技术服务范畴：验证两个已知蛋白质间的相互作用
　　技术服务优势：
　　①安徽中科圣安生物技术有限公司团队经验丰富；
　　②交付周期短，提供原始图片，保证数据真实可靠。

安徽中科圣安生物技术有限公司总部位于安徽省合肥市，核心团队成员由分子生物学、免疫学、细胞学等领域的博士硕士组成，由在国内科研领域有着多年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成，中科圣安生物一直秉承着“以人为本、诚信与品质”的发展理念。 　　中科圣安生物立足于生命科学，为基础生命科学研究领域的科学工作者提供生物学先进技术服务，公司以TurboID邻近标记(Proximity labeling, PL)技术为核心基础，致力于为科研工作者定制目标蛋白质互作网络数据库，为系统地解析蛋白质的功能，揭示生命体的奥秘提供了有力且可靠的技术支持。 　　同时，公司依靠自身的优势，还为科学工作者提供分子生物学技术服务，主要业务包括：酵母双杂交一对一互作验证；GST下拉实验（GST-pull down assay）;免疫共沉淀（co-Immunoprecipitation，co-IP）；双 分 子 荧 光 互 补 实 验 （ Bimolecular fluorescence complementation, BiFC）；荧光素酶互补成像技术（Luciferase complementary imaging，LCI）；凝胶阻滞实验（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA）；亚细胞定位（观察蛋白的定位情况）；TurboID邻近标记技术构建蛋白互作网络数据库等等。