Halo Pull Down服务

Halo Pull Down技术是将Halo标签的融合蛋白固相化到磁珠上，与细胞总蛋白进行孵育，鉴定与之相互作用的蛋白。该方法可以鉴定与已知蛋白相互作用的未知蛋白，也可以鉴定两个已知蛋白间是否存在相互作用。

我们的Halo PullDown技术服务利用无细胞蛋白表达系统来表达Halo标签的融合蛋白（诱饵蛋白），节省时间，蛋白表达载体构建成功后，不需要转化和鉴定，可直接表达目的蛋白。 蛋白表达成功后进行纯化，将纯化后的蛋白与细胞裂解液孵育一段时间后，洗去上清蛋白，将与目的蛋白结合的蛋白洗脱，并进行质谱检测。
 

步骤	内容	交付内容	周期
载体构建	客户提供目的蛋白对应的CDS的序列或质粒， 克隆至合适的表达载体， 质粒测序， 质粒制备。	测序结果	1-2周
无细胞表达+纯化	用小麦芽胚蛋白表达体系进行蛋白表达， 蛋白表达评估 (Western Blot) 。	表达评估报告	1周
Pull Down	细胞裂解， 目的蛋白和总蛋白孵育， 洗脱与目的蛋白结合的蛋白。	银染结果	1周
质谱检测	将洗脱的蛋白进行质谱鉴定。	质谱结果	2周

 

客户提供材料	交付结果
新鲜样本（组织或者细胞）：细胞数量>2.7ⅹ107； 组织样本>3g	载体测序结果 实验过程图 质谱结果

技术流程：

 

技术服务：
1、DAP-seq：高通量检测转录因子或DNA结合蛋白在基因组上的结合位点。
2、酵母单杂交：研究蛋白质和特定DNA序列相互作用。
3、酵母双杂交：检测已知蛋白质之间的相互作用，鉴定与已知蛋白相互作用的未知蛋白。
4、EMSA：鉴定或验证DNA结合蛋白和DNA序列的相互作用。
5、ChIP-seq：高效检测重组蛋白、转录因子在基因组的结合位点。
6、DAP-seq与RNA-seq联合分析： 分析转录因子的靶基因在RNA-seq数据中的表达变化，深入挖掘DAP-seq和RNA-seq测序数据，增加转录组测序的分析深度。
7、DNA-pull down：鉴定与DNA结合的蛋白。
欢迎企业和课题组洽谈合作，电话：15632249798（微信同号），QQ：2522026793