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CUT&Tag技术服务
CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)是研究DNA与蛋白互作的新技术。
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最后更新:2024-10-9半年访问:19
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  • 服务介绍
  • 公司简介
CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)是研究DNA与蛋白互作的新技术。与ChIP-Seq相比,CUT&Tag不需要甲醛交联和免疫共沉淀的过程,而是通过靶蛋白的抗体和Protein A的介导,使Protein A融合的Tn5转座酶靶向并切割DNA,同时在序列两端加上测序接头,经PCR扩增后形成高通量测序文库。

优点:

灵敏度高;重复性好

实验流程图:

细胞与ConA beads结合——细胞渗透性处理——一抗与目的蛋白特异性结合——二抗结合一抗放大信号——加入pA-Tn5与抗体结合——通过Mg2+激活转座体,片段化目的蛋白结合的DNA,并加上接头序列——DNA提取与扩增-高通量测序
 
客户提供材料 交付结果

冻存细胞:细胞数>10万

冻存组织:组织量>40 mg

一抗(请使用ChIP级别的一抗,提供未稀释的抗体原液,

送样前请将抗体的说明书发给我们,以便安排后续实验)

实验过程图

高通量测序原始数据

生物信息学分析结果



CUT&Tag数据:
使用CUT&Tag,鉴定H3K27me3在染色质水平上的peaks。与ChIP-seq相比,在相同Reads条件下,两者的Peaks一致,并且CUT&Tag的信噪比更高、背景更低。
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