大肠杆菌蛋白表达系统

E. coli具有遗传背景清晰、细胞增殖快、成本低、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点，适用于多种蛋白的表达。大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用广泛且经济实惠的蛋白表达系统。缺点是该表达系统易形成包涵体，含有内毒素，没有翻译后修饰的加工功能。该系统适用于表达原核来源的蛋白或不需要翻译后修饰的真核来源蛋白，特别是小分子蛋白。

蓝景科信拥有丰富的E. coli蛋白表达纯化经验，熟练运用多种表达宿主菌，提供多种表达载体和标签的选择。

优势：

遗传背景清晰、细胞增殖快；成本低、表达量高、稳定性好；抗污染能力强；
 

原核E.coli蛋白表达服务内容
步骤	内容	交付内容	周期
密码子优化及基因合成	客户提供目的蛋白对应的CDS序列信息或质粒		1-2周
载体构建	克隆至合适的表达载体 质粒测序 质粒制备	测序结果	1-2周
表达鉴定	10 mL小量表达 3种表达条件尝试 蛋白表达评估(SDS-PAGE)	表达评估报告	1-2周
大量表达和纯化	蛋白纯化(可溶表达) 蛋白变性复性纯化 (包涵体) QC分析(SDS-PAGE)	1-3 mg纯化蛋白，纯度>85%	1-2周
工业级表达及纯化（可选）	放大培养（根据具体需求量） 亲和纯化 纯化蛋白检	蛋白纯度鉴定报告 成品蛋白	根据表达体积商定

表达案例：

 

M：Molecular weight marker

S：Supernatant of cell lysate

P：Precipitation of cell lysate

FT：Flow through

W1：Wash 1

W2：Wash 2

W3：Wash 3

E：Elution from Ni-NTA

技术服务：
1、DAP-seq：高通量检测转录因子或DNA结合蛋白在基因组上的结合位点。
2、酵母单杂交：研究蛋白质和特定DNA序列相互作用。
3、酵母双杂交：检测已知蛋白质之间的相互作用，鉴定与已知蛋白相互作用的未知蛋白。
4、EMSA：鉴定或验证DNA结合蛋白和DNA序列的相互作用。
5、ChIP-seq：高效检测重组蛋白、转录因子在基因组的结合位点。
6、DAP-seq与RNA-seq联合分析： 分析转录因子的靶基因在RNA-seq数据中的表达变化，深入挖掘DAP-seq和RNA-seq测序数据，增加转录组测序的分析深度。
7、DNA-pull down：鉴定与DNA结合的蛋白。
欢迎企业和课题组洽谈合作，电话：15632249798（微信同号），QQ：2522026793