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凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。
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服务介绍
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。
EMSA分析检测中,当DNA结合蛋白与相应的DNA片段或寡核苷酸结合而形成DNA-蛋白质复合物后,DNA片段的分子量及电荷发生改变,因而在非变性聚丙烯酰胺凝胶(native PAGE)电泳体系中,其电泳迁移率发生改变,通常较游离的DNA片段的泳动速率慢得多,因而,在胶片上形成较游离DNA片段滞后的带型。结合滞后条带的有无以及量的多少,可反映出DNA结合蛋白与DNA探针的结合活性、DNA结合蛋白的表达及活化水平。
我公司提供EMSA实验基于生物素标记探针与对应的DNA结合蛋白的特异性结合,再通过生物素与HRP标记的亲和素结合,采用化学发光法检测。可为客户提供验证性的EMSA,竞争性的EMSA以及超迁移EMSA(Super-shift EMSA)实验服务。
客户前期准备
样本类型 |
样本要求 |
细胞样本 |
细胞数不少于1*107个,加入500ul生理盐水。液氮冷冻半小时后,保存于-80°C冰箱,干冰运输。 |
组织样本 |
采集新鲜组织,组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块,放入液氮或-80°C冰箱中保存。提供量动物组织>400mg/样本 |
细胞核蛋白或纯化的转录因子 |
依据实验设计每张膜至少提供50 μL,浓度大于0.5 mg/mL。 |
通用报价
探针合成 |
核蛋白提取 |
蛋白定量 |
验证性EMSA |
竞争性EMSA |
超迁移EMSA |
单独制备1000元/对,做EMSA,则包含在实验报价里面 |
800元(基础收费)+15×样品数 |
250元(基础收费)+8×样品数 |
1800元/膜 |
3200元/膜 |
4000元/膜 |
服务周期:>4周。
注意事项:
抗体需要客户自己提供,也可联系我司代买。若客户自己提供,需要对抗体质量负责,由于抗体或者客户提供的组织样本有问题引起的实验结果错误,我司不负责。
此为通用参考报价,对于特殊样本或者数量增加价格优惠需要与我司销售人员确认