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蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法
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蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，是将聚丙烯酰胺电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
客户前期准备
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样本类型 |
样本要求（细胞、组织、蛋白样本） |
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细胞样本 |
细胞悬液或贴壁细胞：每份样本至少 2×107 细胞，在运输前将培养液充满整个容器，25T细胞瓶常温运输。 |
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冻存细胞：收获培养的细胞后，离心去除培养液，PBS洗2次，立即置液氮中快速冷冻。液氮冷冻半小时后，保存于-80°C冰箱，干冰运输。提供量至少 2×107 细胞。 |
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组织样本 |
组织样品预处理： 采集新鲜组织，组织块以PBS或生理盐水清洗干净，切为小块，放入液氮或-80°C冰箱中保存。提供动物组织＞400mg/样本。 |
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运输：干冰运输。 |
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蛋白样本 |
1. 裂解样品总蛋白量>2mg/ml；细胞样品总蛋白浓度＞1mg/ml；组织样品总蛋白浓度10-15mg/ml。在实验前会进行质检，以保证其质量达到实验要求； 2. 在提取总蛋白时，加入蛋白酶抑制剂和磷酸蛋白酶抑制剂(尤其对于检测磷酸化蛋白)。 |
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运输：加在缓冲液中(蛋白裂解液)低温运输。 |
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客户提供一抗 |
运输：依据说明书，一般4°C或-20°C运输，严禁反复冻融。 |
Western blot参考价格及项目周期
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服务项目 |
服务时间 |
价格 |
服务内容 |
交付结果 |
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蛋白提取 |
1周 |
30元/样品 |
蛋白提取定量 |
蛋白定量结果 |
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Western blot |
1-2周 |
普通蛋白1000元/膜(单个蛋白)；磷酸化蛋白1200元/膜(单个蛋白) |
Western blot法检测蛋白表达量 |
胶片和电子版图片、灰度值分析结果、实验报告 |
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