在基因组水平上,鉴定转录因子的结合位点(transcription factor binding sites, TFBS)非常重要。ChIP-seq是进行体内检测TFBS的主要方法。然而,ChIP-seq依赖于抗体质量,这对低表达的蛋白质具有很大的挑战性。所以,ChIP-seq通常在规模上受到限制,难以进行高通量扩展。因此,只有少数转录因子可以获得结合位点信息,大量TFBS的覆盖范围仅适用于人类和一些模式生物。
DAP-seq具有与ChIP-seq同样的功能。通过体外蛋白表达技术,表达出带有标签的转录因子,和基因组DNA文库在体外进行结合,然后分离出所有与转录因子结合的DNA,再使用高通量测序,找到转录因子的结合位点。
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DAP-seq的优势
与ChIP-seq相比,DAP-seq不需要针对每个转录因子制备特异性抗体。具有快速、高通量、节约时间成本的优势,并且适用于所有的真核生物。
蓝景科信提供DAP-seq全流程技术服务+个性化数据分析,具有丰富的技术服务经验。
已经做过的材料包括:拟南芥,水稻,小麦,玉米,大豆,苜蓿,百脉根,菜心,枣,荔枝,香蕉,毛果杨,胡杨,油松。
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技术服务:
1、DAP-seq:高通量检测转录因子或DNA结合蛋白在基因组上的结合位点。
2、酵母单杂交:研究
蛋白质和特定
DNA序列相互作用。
3、酵母双杂交:检测已知蛋白质之间的相互作用,鉴定与已知蛋白相互作用的未知蛋白。
4、EMSA:鉴定或验证DNA结合蛋白和DNA序列的相互作用。
5、ChIP-seq:高效检测重组蛋白、转录因子在基因组的结合位点。
6、DAP-seq与RNA-seq联合分析: 分析转录因子的靶基因在RNA-seq数据中的表达变化,深入挖掘DAP-seq和RNA-seq测序数据,增加转录组测序的分析深度。
7、DNA-pull down:鉴定与DNA结合的蛋白。
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