【北京总部】Bio-Rad 售后服务热线:4008-090039.
MyCycler 是一款 96 孔高性价比 PCR 仪。它配备有12 厘米(4 .7") 高分辨率显示屏,用户可以容易而快速的进行程序编写。人性化的菜单可以帮助用户以最快的速度完成反应的各项设置。其具体性能如下:
? 96 孔反应模块,专为0 .2ml 的 PCR 反应管或反应板而设计
? 直观的程序编写设置,包括温度、时间和程序等
? 用户可设置休眠模式使其更节电
? 仪器每次运行情况会保存在运行报告和校正报告中
? 自动调节式热盖适合于各种标准的 0 .2ml PCR 反应管,条管和反应板
? 可选择进行梯度 PCR 功能升级,可以同时在8个不同温度条件下孵育,以便在一次实验中优化实验条件
基本的PCR须具备
1.要被复制的DNA模板 Template
2.界定复制范围两端的引物Primers.
3.DNA聚合酶Taq. Polymearse
4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。
工作原理
利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。
反应步骤
分别是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性, 将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板. 而Annealing 则是令 Primers于一定的温度下(冷却至55~60℃)附着于模板DNA两端。 最后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下(加热至70~75℃)进行引物的延长 Extension of primers及另一股的合成。
PCR的最早设想核酸研究已有100多年的历史,二十世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可tRNA基因”。
实现
1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制,只是改进与完善Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的Klenow片段,其缺点是:
①Klenow酶不耐高温, 90℃会变性失活,每次循环都要重新加。
②引物链延伸反应在37℃下进行,容易发生模板和引物之间的碱基错配,其PCR产物特异性较差,合成的DNA片段不均一。此种以Klenow酶催化的PCR技术虽较传统的基因扩增具备许多突出的优点,但由于Klenow酶不耐热,在DNA模板进行热变性时,会导致此酶钝化,每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期,给PCR技术操作程序添了不少困难。这使得PCR技术在一段时间内没能引起生物医学界的足够重视。
1988年初,Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR,其扩增的DNA片段很均一,真实性也较高,只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次,仍需加入新酶。
1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌thermus aquaticus 中提取到一种耐热DNA聚合酶。 此酶具有以下特点:
①耐高温,在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。
②在热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶。
③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率,增加了扩增长度2.0Kb。由于提高了扩增的特异性和效率,因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶IKlenow片段区别,将此酶命名为TaqDNA多聚酶Taq DNAPolymerase。此酶的发现使PCR广泛的被应用。
bio-equip.com
公司主要维保进口和国产实验室设备,凭借维保产品配件供应链的完善为各大医院、高校、实验室提供及时、高效的服务,使得公司在行业内有较好的信誉。多年来公司凭借良好售后技术为客户提供具性价比的实验室仪器设备维保服务。高科技实验设备运用于科研、生物制药、食品、医疗和环保等领域,致力于做好实验室服务。公司专注于科学的前沿和发展,通过精湛售后服务为客户提供优秀的产品。