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常规植物的根、茎、叶、花、果实、花芽、叶芽、等都做过。对于一些有特殊要求的样品,也可以提供连续切技术服务,通过将样品连续切片的方式,找到需要观察到的生长点。
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植物石蜡切片技术服务
植物石蜡切片技术是显微技术上最重要最常用的一种方法,其优点在于:1、应用范围广,几乎适用于所有植物材料;2、能切成极薄而且连续的切片,较清楚地显现细胞、组织的细胞结构;3、切片可以长期保存、便于以后观察比较。因此,这项技术自18世纪创建以来,在植物细胞、组织研究史上发挥了重要作用,并且在今后仍将作为一项常规技术而发挥作用。
植物石蜡切片技术整个过程较为复杂,可大致概括为:取材-固定-脱水-透明-浸蜡-包埋-修块-切片-粘片-染色-制片。
取材:根据不同观察研究的目的,选择合适的材料。固定时应根据材料的性质及制片的目的选用固定液的用量,一般最少为所固定材料总体积的20倍。
固定:常用的固定液有FAA、卡诺和纳瓦固定液。含水量大的材料,应多换几次固定液,保证固定液的浓度。对所固定材料的大小一般要求0.5-1平方厘米为宜,尽量小而薄。固定后,将样品管置于真空泵中,反复抽气。直到样品沉入固定液,使样品充分固定。固定完的材料,若不能及时制样,可置于70%酒精中存放。
脱水:样品置于样品篮中,30%,50%,70%,85%,95%,100%酒精梯度脱水。
透明:样本用纯酒精和二甲苯1:1比例混合液处理2-3h,转入纯二甲苯中,每次1h,共处理2次。除去样品中的酒精,使材料透明。
浸蜡:石蜡慢慢溶于透明剂中,然后完全取代透明剂进入材料中,将上述已透明好的材料换入新的二甲苯中,然后加入等体积的碎蜡,置于4度冰箱中,备切片用。
包埋:浸足石蜡的材料包埋在石蜡里成为一定形状以利于切片。浸蜡后没在60度烘箱中,换2次已溶解的纯蜡,每次2h。
修块:将包埋好的材料切成小块,每个小块包含一个材料。然后按想要的切面将蜡块切成梯形,切面在梯形上部,
切片:切片厚度8-10um
粘片:切好的蜡片沾在载玻片上的过程。
染色制片:常用染色方法有番红固绿染色、甲苯胺蓝染色、尼罗红染色、油红O染色、HE染色等等。
封片拍照:普通光学显微镜拍照。
迈斯普生物专业提供植物石蜡切片技术服务。自公司成立以来,已为广大科研客户提供过几千例不同植物不同组织的石蜡切片技术服务。可以做常规切片和连续切片。例如水稻、玉米、大豆、高粱、樱桃、辣椒、杏、李、百合、苹果、油菜。对于植物的根、茎、叶、花、果实、柱头、叶芽、花芽等都有经验。花芽发育、叶芽发育、果实发育、花粉管萌发、常规的叶、幼嫩茎秆等形态学结构都可以提供相关技术服务。欢迎咨询!
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