ChIP检测

第一部分：抗体IP验证
◆ 免疫沉淀(Immunoprecipitation，IP)
服务内容
1. 温和条件下进行蛋白抽提，BCA定量，调整蛋白浓度
2. 样品预处理：用Protein A/G Sepharose孵育
3. 样品与IP抗体进行孵育
4. 洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex，并对免疫复合物进行变性处理
5. 沉淀产物SDS-PAGE或者WB鉴定（目前暂不提供别的鉴定）
6. Western blot检测
（1） 电泳：聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）分离蛋白样品
（2） 湿法转印（BLOTING：Tank Transfer）
（3） 杂交：用抗体鉴定膜上的特定蛋白（INCUBATION: Antibody）
（4） 化学发光检测（ECL），胶片曝光，TotalLab Quant软件读取IOD值（可选）
样品要求（样品处理及保存见附件）
1. 细胞＞1×10⁷；组织＞30mg；细菌湿重＞50mg；植物＞100mg；血清＞50ul
2. 样品蛋白浓度＞1mg/ml，蛋白量＞500ug/样品
收费标准

服务项目	收费标准￥	实验周期
免疫沉淀	7500/基因	3-4周
免疫沉淀+可曝光marker	7800/基因	3-4周
ImageQuant TL读取条带IOD值及计算	询 价!

客户提供材料
1、 新鲜或正确保存的样品
2、 目的蛋白一抗
3、 阳性对照样品（尽量提供）
4、 相关文献（可选）
提交给客户结果
1、预实验曝光结果（胶片及扫描图），预实验采取2个一抗稀释度
2、正式实验曝光结果（胶片及扫描图）
3、完整实验报告
4、IOD值分析报告（可选）
5、抗体是否可以适用于IP是进行ChIP的前提
服务说明
1. 待检测样品可以是待检测蛋白样品，也可以是细胞、组织等其他样品；
2. 免疫沉淀用抗体；
3. 检测用抗体;
4. 特异性二抗由天德悦（北京）生物科技有限责任公司提供;
5. IP检测可以不进行，但是不能保证后续实验的结果。
对照设置
1、 空白：无抗体，只有protein A/G
2、 阴性对照：无蛋白，有抗体及protein A/G
3、 阴性对照：未转染细胞或者基因敲除样品
4、 无关空白抗体
5、蛋白裂解液上清：Input
 
  
第二部分
◆ 染色质免疫共沉淀（Chromatin Immunoprecipitation，ChIP）
服务内容
1. 样品甲醛交联固定、终止、收集样品、裂解样品
2. 超声或者酶解处理样品DNA成片段，琼脂糖电泳检测
3. 样品预处理：用Protein A/G Sepharose孵育
4. 样品与IP抗体进行孵育
5. 洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex，并对免疫复合物进行变性处理，提取DNA样品
6. 检测
（1） 实时荧光定量PCR检测（最常用，免费检测）
（2） DNA芯片检测（需要联系测试厂家，需要另付费。询价）
（3） DNA产物测序（需要联系测试厂家，需要另付费。询价）
收费标准

服务项目	收费标准￥	实验周期
ChIP	25000/基因	3-4周
实时荧光定量RT-PCR	免费	2周

 
客户提供材料
1、新鲜或正确保存的样品
2、目的蛋白一抗，空白或者阴性同种属IgG
3、阳性对照样品（尽量提供）
4、ChIP检测试剂盒
 
 

易科拜德是集研发、生产、销售、客户服务为一体的生物技术公司，全力打造高品质生物试剂产品链和技术服务链。自成立之初，易科拜德就认识到产品质量是企业高速成长的生命线。为此，在每一类产品的生产过程中，逐步建立起有针对性的、标准严格的生产工艺与质控体系，确保产品的规模化生产与质量稳定。同时，根据市场的需求，不断地进行产品改进与新产品研发，紧跟现代生物学研究与应用的前进步伐！致力于每位客户的满意和成功，为客户提供最有竞争力的产品和解决方案，持续为客户创造最大价值是易科拜德一贯秉承的信念；立志成为国内有影响力的中国生物技术公司是易科拜德终极追求目标。