高效液相色谱法检测(HPLC)服务_科研实验仪器共享平台

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用

高效液相色谱，利用经高压泵加压后的流动相带动待测物各组分通过色谱柱，因各组分从色谱柱中流出的速度不同，从而实现不同组分的分离，各组分先后从柱内流出后通过检测器的后被转化成电信号，再由数据系统收集处理，最终得到色谱图，与标准曲线进行对比，通过保留时间进行定性分析，也可通过计算色谱峰面积和峰高等进行定量分析。

高效液相色谱法具有以下特点

(1)分离效能高由于新型高效微粒固定相填料的使用，液相色谱填充柱的柱效可达2*10^3-5*10^4块/m理论塔板数，远远高于气相色谱填充柱10^3块/m理论塔板数的柱效。

(2)选择性高由于液相色谱柱具有高柱效，并且流动相可以控制和改善分离过程的选择性。因此，高效液相色谱法不仅可以分析不同类型的有机化合物及其同分异构体，还可分析在性质上极为相似的旋光异构体，并已在高疗效的合成药物和生化药物的生产控制分析中发挥了重要作用。

(3)检测灵敏度高在高效液相色谱法中使用的检测器大多数都具有较高的灵敏度。如被广泛使用的紫外吸收检测器，最小检出量可达10^(-9)g;用于痕量分析的荧光检测器，最小检出量可达10^(-12)g。

(4)分析速度快由于高压输液泵的使用，相对于经典液相(柱)色谱，其分析时间大大缩短，当输液压力增加时，流动相流速会加快，完成一个样品的分析时间仅需几分钟到几十分钟。

高效液相色谱法除具有以上特点外，它的应用范围也日益扩展。由于它使用了非破坏性检测器，样品被分析后，在大多数情况下，可除去流动相，实现对少量珍贵样品的回收，亦可用于样品的纯化制备。

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