打靶策略需要设计含有位点信息的Donor Vector, 以及点突变位点附近的高效SgRNA。体外转录获得的SgRNA、Cas9 mRNA与donor共注射至小鼠受精卵,然后获得阳性F0代小鼠。
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利用CRISPR-Cas9技术基因突变的小鼠,可以对基因功能区域进行定点突变,研究基因的关键功能域和氨基酸,对于阐述基因的功能,以及针对性药物的开发有重要意义。也可以对调控区进行突变,研究基因的调控。
打靶策略需要设计含有位点信息的Donor Vector, 以及点突变位点附近的高效SgRNA。体外转录获得的SgRNA、Cas9 mRNA与donor共注射至小鼠受精卵,然后获得阳性F0代小鼠。
小鼠基因突变打靶策略图:
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