免疫组化(石蜡切片)

客户需要提供标本和一抗
实验步骤

1.脱蜡至水

二甲苯Ⅰ(8min)

二甲苯Ⅱ(8min)

无水乙醇和二甲苯1:1(5min)

无水乙醇(3min)

95%乙醇(3min)

85%乙醇(3min)

75%乙醇(3min)

PBS洗3遍

2.抗原修复

抗原修复液柠檬酸钠或EDTA抗原修复液修复。
0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液（CB,ph6.0,1000ml）PH值6.0。
抗原修复100℃ 20min ;自然冷却至室温。（如果是脱钙的标本，抗原修复可以10min）
3.PBST洗2遍，PBS洗1遍。每次5min。
4.用30%H₂O₂和甲醇配制3%的H₂O₂溶液。室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS洗3遍。
5.封闭 3-5%BSA或者1-2%山羊血清封闭30min
6.除去封闭液液，每张切片加1滴或50μl的第一抗体.
7.洗一抗。PBS洗3遍，每次5min。
8.加聚合物辅助剂1 。37℃孵育20min。
9.孵二抗2h(室温)；可以考虑37℃30min。
10.洗二抗 PBS洗3遍，每次5min
11.DAB显色.10Sec—30sec.
12.自来水充分水洗.染苏木素、水洗、酒精分化、脱水、透明、封片。
我们提供：
1. 提供完成实验的玻片
2. 每张切片提供1张合适视野的照片
3. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等，实验结果将以电子或书面形式提交给您

服务周期：一周以内
温馨提醒：提供实验必要的信息，例如组织来源、实验目的和拍照要求

bio-equip.com

公司简介

　　北京瑞金特生物科技有限公司是由国内外多名从事生命科学研究的技术人员创建，致力于基因水平和细胞水平的技术研究，并基于研究为科研用户提供相关的技术服务、项目承包、SCI学术论文发表支持、基金申请咨询/标书修改、科研方案设计咨询、实验技术指导、数据统计挖掘、论文写作指导等。

     瑞金特生物秉承“专注、专业”的理念。“以客户为本、让客户满意”的服务宗旨，一如既往的致力于提供高品质、高效率的生物技术服务，努力将公司打造成为国内一流企业。

因为专注、所以专业！ 选择瑞金特、选择专业！  

企业文化

瑞金特生物在中国各地建立了强大的服务网络

专注敬业的瑞金特员工时刻要求自己：以客户为中心；以质量为生命；以创新为动力；以结果为导向，为客户提供快速、优质的服务。

实验中心简介

　　瑞金特实验中心坐落于中关村生命科学园区，提供课题设计（包括文献搜索、查阅，分析实验思路的合理性，证明所需要的方法和检测所需的指标），科研项目承担合作，科研数据整理，分析，以及后续SCI科研文章翻译，修改，润色，指导投稿整体服务。

瑞金特实验中心专家团队具有多学科背景，很多专家是多个期刊的同行评审(peer reviewer)，有多项科研立项、评估、科研转化的经验和能力，可以很好以为广大科研朋友的课题提供帮助和服务。让科研者的科研项目有一个值得信任的合作平台，让科研者的科研成果有一个更好的归宿。

同时瑞金特生物拥有国外科研中心，一些难度和仪器要求较高的试验，中心可以提供在美国完成试验的服务。

基因相关课题研究

　　瑞金特生物拥有多年从事临床和科研的专家顾问团队，有经验丰富的实验设计人员和专业操作技术人员，有自主开发的新型分子检测技术，可以提供课题设计咨询、前沿技术引进、实验设计、体系优化、技术培训、数据分析整理、英文文章撰写等科研服务，团队将综合考虑老师的课题研究，为其制定一套最合理、最实惠、最快捷的整体研究方案，并在规定时间内为其提供高质量的实验数据。当然，老师也可以选择任何单一的服务内容，瑞金特生物公司将针对性地提供相应的解决策略。

因为瑞金特生物是一支由科研经验丰富、技术背景过硬、实验操作精准的专业人员组成的核心团队，瑞金特实验中心有充足的信心向老师保证：

1. 委托方文章发表在IF>1.0的杂志上（课题研究价值一般，科研经费支持一般）

2. 委托方文章发表在IF>3.0的杂志上（课题研究价值较高，科研经费支持一般或者课题研究价值一般，科研经费支持较高）

3. 委托方文章发表在IF>5.0的杂志上（课题研究价值较高，科研经费支持较高）

详细实验操作流程

瑞金特实验中心拥有从事临床和科研多年的专家顾问团队，有经验丰富的专业操作技术人员，可以为老师们提供课题设计咨询，为科研课题申报与实验总体设计、数据分析整理提供专业的建议与可行性评估，为将来发表高水平文章提供良好的基础，还可以为客户提供完成整体实验的全过程服务。

所涉及的领域有：分子生物学、细胞生物学、药物筛选、动物模型构建等。

实验项目分类

分子生物学类：

引物设计合成、基因测序、全基因合成

DNA、RNA提取、回收、纯化

RT-PCR实验技术服务

SNP、SSR检测分析

SSR引物建库、筛选验证

cDNA文库构建

甲基化检测分析

实时荧光定量PCR技术

基因克隆突变服务

质粒与载体构建服务

MicroRNA系列研究：

MicroRNA芯片检测

MicroRNA生物信息数据分析

MicroRNA动物实验

MicroRNA蛋白水平实验

MicroRNA实时定量PCR检测

MicroRNA慢病毒介导基因调控

病理类：

扫描电镜技术服务

透射电镜技术服务

HE染色/特殊染色/技术服务

免疫组化，免疫荧光实验服务

Tunel（原位末端凋亡法）技术服务

Northern、Southern技术服务

ELISA（酶联免疫吸附法）技术服务

激光共聚焦

细胞生物学：

高通量检测

MTT检测

血管生成

细胞迁移

细胞增殖及相关

细胞周期检测

流式细胞术检测凋亡

细胞原代、传代培养

细胞模型构建、转染

病毒介导基因调控类：

腺病毒载体构建、包装、纯化、鉴定

慢病毒载体构建、包装、纯化、鉴定

腺病毒扩增

基因过表达实验服务

活体转染

siRNA化学合成

shRNA设计和构建

RNAi（基因沉默）整体实验服务

转基因动物制备

蛋白质与免疫学：

蛋白纯化

多肽合成

多肽修饰

单克隆抗体制备

多克隆抗体纯化

Western-blot 实验服务

蛋白双向电泳实验服务

质谱分析

蛋白质N端测序

酵母双杂交系统

免疫沉淀

蛋白原核表达

高通量检测：

 高通量功能基因筛选

高通量DNA甲基化区域检测

全基因组测序

目标区域测序

外显子组测序

小RNA测序

细胞模型与动物模型：

原代细胞培养

动物造模

分子靶向药物筛选模型

心血管疾病模型

心肌缺血模型

移植肿瘤裸鼠模型

动脉粥样硬化模型

动脉瘤实验模型

类风湿关节炎模型

等

科研方案设计与SCI

科研文献论著翻译

SCI论文翻译、编辑、协助发表

临床实验/科研实验设计方案指导