蛋白质表达与纯化
我公司拥有丰富的蛋白质表达及纯化经验,以客户提供的表达克隆开始,进行条件的优化,为客户提供所需蛋白质。
服务编号 |
服务内容 |
制备时间 |
技术参数 |
价 格 |
bs-P01 |
纯化5mg蛋白质(客户提供表达质粒或菌株) |
4周工作日 |
蛋白纯度(电泳纯≧85%) |
4000元/5mg |
bs-P02 |
纯化10mg的蛋白质(客户提供表达质粒或菌株) |
4周工作日 |
蛋白纯度(电泳纯≧85%) |
6000元/10mg |
技术报告 |
提供详细的纯化蛋白报告及实验过程、步骤、检测报告(委托制备,签订正式合同文本) |
客户需要提供的信息及材料:
1.待表达基因的序列
2.表达载体的序列(质谱图)
3.表达克隆质粒和菌株
注:目前只承接提供带GST标签、His标签的融合蛋白表达及纯化,其它标签蛋白需协商。
分子生物学技术服务
序 号 |
服务名称 |
价 格 |
一 |
DNA抽提及纯化 |
面议 |
二 |
RNA抽提及纯化 |
面议 |
三 |
mRNA分离及纯化 |
面议 |
四 |
PCR及产物纯化 |
面议 |
五 |
质粒抽提 |
面议 |
六 |
RT-PCR |
面议 |
七 |
载体构建 |
面议 |
八 |
RNA干扰 |
面议 |
服务详细介绍
一、DNA抽提及纯化
根据客户要求,利用指定试剂盒,对动物(组织、细胞、血液等)、植物(各种组织)、微生物、病毒等进行DNA抽提及纯化。
提供结果:DNA、电泳图、OD值及定量结果(浓度及体积)。
二、RNA抽提及纯化
根据客户要求,利用指定试剂盒或自产试剂盒(主要针对特殊组织,如含次生代谢产物丰富的植物组织等),对动物(组织、细胞、血液等)、植物(各种组织)、微生物、病毒等进行RNA抽提及纯化。
提供结果:RNA、电泳图、OD值及定量结果(浓度及体积)。
三、mRNA分离及纯化
根据客户要求,利用Qiagen公司分离纯化试剂盒或国产分离纯化试剂盒,对总RNA进行mRNA的分离及纯化,以获得高质量的mRNA用于后续的建库等工作。
提供结果:mRNA、电泳图及定量结果(浓度及体积)。
四、PCR及纯化
根据客户要求,利用客户提供的样品及引物,进行批量PCR并进行产物纯化,包括前期的转化、铺板、挑菌、摇菌等工作,可提供全程服务。纯化建议采用millipore公司纯化板。
提供结果:PCR产物、电泳图及定量结果(浓度及体积)。
五、质粒抽提
根据客户要求,利用进口或国产试剂盒,对客户提供样品进行质粒小抽或大抽。为客户提供内毒素含量达到科研级和医药级的质粒DNA。
提供结果:质粒、实验报告(包括质粒电泳照片、鉴定结果及OD值测定结果)、1.7≤OD260/OD280≤2.0的质粒。
六、RT-PCR检测
RT-PCR是以RNA为起始材料经逆转录反应产生cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增以获取目的基因,用于检测细胞或组织中基因表达变化。
实验流程:包括RNA制备、RT反应、PCR反应等。
引物要求:最好由服务方设计并合成。如果客户提供,需提供引物序列;引物若为干粉,请提供引物的准确量;若为稀释液,请提供引物的最终浓度(每个反应所需的引物满足以下要求:浓度≥10pm/μl,体积≥10μl)。
结果报告内容:电泳图谱及相关说明;实验流程。
七、载体构建
载体构建是将目的基因与载体连接并转化得到重组质粒的过程,客户需提供来源可靠的组织,细胞或血液以便用于目的基因的扩增。
1、原核表达载体的构建、诱导表达和蛋白纯化
实验过程:RNA抽提、RT-PCR、连接、转化、挑选阳性克隆、测序、诱导表达、蛋白纯化
提供结果:
(1)、提供测序报告*1份
(2)、PCR扩增电泳图片*1份
(3)、重组质粒菌种或者质粒(30ul)*1份
(4)、纯化后蛋白
(5)、实验报告*1份
2、真核表达载体的构建
实验过程:RNA抽提、RT-PCR、连接、转化、挑选阳性克隆、测序
提供结果:
(1)、提供测序报告*1份
(2)、PCR扩增电泳图片*1份
(3)、重组质粒菌种或者质粒(30ul)*1份
(4)、实验报告*1份
3、腺病毒载体构建及病毒包装服务
* 目的基因克隆载体的构建
实验过程:RNA抽提、RT-PCR、连接、转化、挑选阳性克隆、测序
提供结果:
(1)、提供测序报告*1份
(2)、PCR扩增电泳图片*1份
(3)、重组质粒菌种或者质粒(30ul)*1份
(4)、实验报告*1份
* 目的基因表达载体构建
实验过程:酶切,连接,转化,挑选阳性克隆,PCR鉴定,酶切鉴定
提供结果:
(1)、PCR鉴定图片*1份
(2)、酶切鉴定图片*1份
(3)、实验报告*1份
* 包装腺病毒
实验过程:酶切,共转染细胞,细胞培养,鉴定,纯化,测定浓度
提供结果:
(1)、实验报告*1份
(2)、转染后图片*1份
(3)、包装好的病毒*1份(滴度>5*107)
4、慢病毒载体构建及病毒包装服务
* 目的基因克隆载体的构建
实验过程:RNA抽提、RT-PCR、连接、转化、挑选阳性克隆、测序
提供结果:
(1)、提供测序报告*1份
(2)、PCR扩增电泳图片*1份
(3)、重组质粒菌种或者质粒(30ul)*1份
(4)、实验报告*1份
* 目的基因表达载体构建
实验过程:酶切,连接,转化,挑选阳性克隆,PCR鉴定,酶切鉴定
提供结果:
(1)、PCR鉴定图片*1份
(2)、酶切鉴定图片*1份
(3)、实验报告*1份
* 包装慢病毒
实验过程:酶切,共转染细胞,细胞培养,鉴定,纯化,测定浓度
提供结果:
(1)、实验报告*1份
(2)、转染后图片*1份
(3)、包装好的病毒*1份(检测滴度)
八、RNA干扰服务
近年来研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性降解,导致其相应基因的沉默。
这种转录后基因沉默的机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi):
1、siRNA的设计及合成,由客户自行设计,或由公司代为设计目前已证实的siRNA,以及阴性对照,并由DNA合成仪合成
2、构建RNAi干扰载体,PCR及测序鉴定
3、PCR检测mRNA表达以及western blotting检测蛋白的表达
提供结果:
1、PCR鉴定图片*1份
2、提供测序报告*1份
3、酶切鉴定图片*1份
4、RT-PCR电泳图*1份
5、western blotting结果*1份
6、实验报告*1份
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北京博奥森生物技术有限公司成立于2001年,注册资本2000万元,是集免疫学科研试剂研发、生产、销售为一体的国家高新技术企业。在公司近1300平米的研发中心楼内,拥有SPF级实验动物房、GMP级单克隆抗体制备平台,同时购置了CSBio多肽合成仪、Akta全自动液相色谱系统、BD流式细胞仪、Leica冷冻切片机等多种生产、检测仪器。公司还拥有一批技术精湛、经验丰富的科研开发团队,在免疫和分子生物学等领域拥有多项自主知识产权。
自成立之初,公司始终秉持“自主研发、原始创新,为全球生命科学研究提供优质服务”的经营理念。提供全面的科研抗体、试剂,诊断抗体原料,以及CRO服务。公司现拥有近两万种抗体产品,涵盖人蛋白靶点13000多个。特色产品有特异磷酸化抗体及专利授权AF荧光标记抗体等。此外,公司还提供完善的单/多克隆抗体制备、标记、重组蛋白、多肽合成及各项免疫学检测技术服务等。公司恪守ISO9001:2008国际质量管理体系认证要求,致力于打造“Bioss”精品抗体品牌。 2010年博奥森(波士顿)在美国设立了面向全球抗体市场的商务拓展及国际市场营销总部,不断扩展全球销售体系,主打Bioss国际品牌,向全球科研工作者提供高质量的科研抗体产品。迄今为止,Bioss产品已遍布全球多个国家和地区,并已成为数家国际知名抗体公司的OEM合作伙伴。Bioss抗体产品已出现在数千篇高质量SCI文章中,获得了全世界众多生命科学领域科研人员的认可。
百舸争流,只争朝夕。近二十年的探索和拼搏,为Bioss品牌在免疫学试剂领域奠定了坚实的基础。我们将在未来勇于开拓,自主创新,为生命科学研究提供更加优质的产品和服务,回报全球用户的信任,为生命科学进步尽绵薄之力。
温馨提示:产品仅用于实验室科研及非临床用途。