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SRAP技术
相关序列扩增多态性(Sequence—related amplified polymorphism,SRAP)是一种新型的基于PCR的标记系统,为显性标记。
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最后更新:2022-2-8半年访问:10
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一.SRAP技术简介

    相关序列扩增多态性(Sequence—related amplified polymorphism,SRAP)是一种新型的基于PCR的标记系统,为显性标记,是由美国加州大学蔬菜系Li与Quiros博士于2001年在芸薹属作物开发出来。该标记通过独特的双引物设计对基因的ORFs(Open reading frames开放阅读框 )的特定区域进行扩增,上游引物长17bp,对外显子区域进行特异扩增。下游引物长18bp,对内含子区域、启动子区域进行特异扩增。因不同个体以及物种的内含子、启动子与间隔区长度不同而产生多态性。该标记具有简便、高效、产率高、高共显性、重复性好、易测序、便于克隆目标片段的特点。目前已成功地应用于作物遗传多样性分析、遗传图谱的构建、重要性状的标记以及相关基因的克隆等方面。

二.SRAP技术流程

    ★ 引物选择

    ★ PCR扩增 

    ★ PAGE检测或琼脂糖电泳检测 

    ★ 数据分析或克隆及测序

    ★ 序列分析        

三.客户提供:

    ★  基因组DNA:

       ●至少15μL样品,浓度为50-100ng/μL;

       ●2%琼脂糖电泳检测有DNA主带,没有降解;

       ●DNA经过DNA纯化试剂盒或磁珠纯化;

       ●DNA需溶解在TE或灭菌的去离子水里;

       ●DNA溶解后,肉眼看不到杂色;

    ★ 植物材料: 新鲜组织,叶片采用硅胶干燥后或干冰运输;

    ★ 动物材料: 新鲜组织,无水乙醇封存低温运输;

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