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液相芯片在临床|肿瘤标志物中的检测
满足的对癌症、炎症通路、免疫反应和细胞代谢的可溶性生物标志物以及包括信号通路等关于肿瘤发生、发展的机制研究提供系统性研究平台。
服务类别:芯片与生物信息学总访问:936
最后更新:2015-11-17半年访问:6
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  肿瘤标志物是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或是由机体对肿瘤反应而异常产生和/或升高的,反映肿瘤存在和生长的一类物质。肿瘤标志物存在于病人的血液、体液、细胞或组织中,可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法测定,且对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、观察疗效、监测复发以及预后评价具有一定的价值。

肿瘤标志物可用于判断癌症病程分期,体循环癌症生物标志物可反映机体对肿瘤的免疫应激以及肿瘤及其微环境之间的相互作用。单一的生物标志物往往不足以可信区分肿瘤与非肿瘤;多重检测技术使得同步化检测多种癌症生物标志物成为可能,是通向改善诊断和治疗的重要途径。

某些肿瘤发生前或发生时常有慢性炎症。已有研究证实,炎症介质、炎症相关基因多态性与癌变之间存在病原学关系。潜在的炎症过程可通过不同的机理影响肿瘤间室与癌症分期。从目前的研究来看,慢性炎症似乎总是先刺激而后抑制肿瘤的发展。而大多数的肿瘤都可以从免疫细胞中获益并依赖免疫细胞。慢性炎症的持续存在在启动、维持、促进肿瘤生长中发挥重要作用。因此调节免疫反应仍将是治疗干预的理想目标。

肿瘤是失去了正常生物调控的异常生长、分化的细胞和组织。和其他疾病比较,肿瘤有两个明显的临床特征:一是肿瘤的转移特性。二是早、中期肿瘤无症状。对于无症状的肿瘤病人,肿瘤标志物常常是唯一的能早期发现肿瘤的线索。

胚胎蛋白标志,甲胎蛋白(α-fetoprotein, AFP)和癌胚抗原 (carcioembryonic antigen,CEA)的发现推动了肿瘤标志物的临床应用,肿瘤标志物开始用于肿瘤辅助诊断、治疗监测。随着分子生物学技术的发展,大量肿瘤标志物被发现和使用。肿瘤标志物大多都有敏感度高的特点,但由于组织特异性不强,一般以多个肿瘤标志物联合使用来增加特异性。

主要的肿瘤标志物作用:

肿瘤标志物 组织 早期判断
CEA(癌胚抗原) 广谱 结肠直肠癌,乳腺癌
AFP(甲胎蛋白) 肝脏 睾丸癌,肝细胞癌
CA125 卵巢 卵巢癌,胰腺癌,肺癌,乳腺癌
CA19-9 消化道 胰腺癌,胆管癌,胃癌,肠癌
PSA(前列腺特异性抗原) 前列腺 前列腺癌
CA15-3 乳腺 乳腺癌
HCG(绒毛膜促性腺激素) 子宫 胚胎细胞癌,滋养层肿瘤

常用肿瘤标志物联合指标:

恶性肿瘤 肿瘤标志物联合指标
肝癌 AFP+CEA
胰腺癌 CEA+CA19-9
乳腺癌 CA15-3+CEA+CA125
卵巢癌 CA12-5+β-HCG+AFP+CEA
前列腺 FPSA/TPSA+PAP
甲状腺 CEA+CA19-9+TBG+T3,T4,FT3,FT4,TSH

MILLIPLEX MAP提供最常用的25种肿瘤标志物,可以自由组合用于不同肿瘤早期发现的临床研究和新肿瘤标志物的验证。与细胞因子组合联合使用,有助于深入研究肿瘤免疫,及肿瘤疾病分期和预后研究。

对肿瘤细胞的信号通路了解有助于了解癌细胞在生长、分化、增殖和凋亡过程中与正常细胞的区别,进而找到抗癌药物的作用靶点。这类与信号通路相关的肿瘤标志物具有广谱性,往往可用于对肺癌、胰腺癌、乳腺癌等多种组织癌变的生物学机制进行研究和新药发现。

MILLIPLEX MAP提供多种调节肿瘤发生和转移相关的信号通路组合,包括了细胞凋亡、免疫通路、Akt mTOR和MAPK通路等。

液相芯片技术优势 
 

  • 高通量:同时对同一样本多个指标进行检测,节省样本、试剂、时间和精力;高通量样品处理和高通量96/384空板同时上样检测。
  • 操作简单,减少实验误差,具有更好的稳定性(激光,荧光技术;液相环境更好实现检测物化学稳定性)、更好的重复性与批间差(100个微球的平均实验结果)。
  • 灵活性好:开放实现平台,同一机器可以用于免疫分析,核酸检测,酶学分析,受体配体识别等多种研究工作。不同检测指标可以自由组合,满足不同科研和临床需求。
  • 灵敏度高(下表):液相芯片最低检测浓度可达到1pg/ml,线性范围宽,可达4个数量级;与ELISA和质谱分析具有很强的一致性。
  • 样本用量少:小于50ul样本可分析多达500个指标。
  • 成本低:随着检测指标的增多,成本越低,单次单个指标计算,成本明显低于其他检测方法。

                      液相芯片与其他检测方法灵敏度和线性范围比较 
 

方法 灵敏度(mol/well  线性范围
ITA 10- 5~10-6  
ELISA 10- 8~10-9  
RIA 10-10~10-12  
CLIA 10- 15~10-16  
TRFIA 10- 18~10-19  
流式CBA技术 10- 28  
Luminex 100/200 10- 30  
Flexmap 3D 10- 31~10-32  

 xMAP技术与ELISA免疫检测的比较:
对于传统的ELISA,人们发现每次只能检测一种指标,而xMAP技术的出现,使得在同一份样本中检测指标数高达500个,为科学家们提供了一个快速、灵活、高通量的检测平台。
以80份检测样本中的10个蛋白指标进行同时检测,比较如下:

Millipore长期致力于蛋白质研究领域的研究和发展,从细胞外到细胞内建立了高品质的蛋白质研究平台,开创了蛋白质研究的全新时代,也是全球首家可以提供最新FLEXMAP 3DTM分析平台的公司。Milliplex的多功能液相芯片平台基于xMAP技术,造就了Milliplex液相芯片系统无与伦比的检测特异性和灵敏度。

本实验室除了提供液相芯片技术以外,还提供流式细胞分选 ,ChIP|Co-IP免疫共沉淀,Pull Down,活细胞工作站,WB,流式细胞成像,基因载体构建,细胞基因敲除等高端技术 。

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