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目前用于非编码RNA研究的主要方法有实时荧光定量PCR技术、荧光原位杂交、RNA 干扰和 RNA 结合蛋白免疫沉淀等,而荧光定量PCR方法作为检测非编码RNA表达的金标准,其应用更是广泛。
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非编码RNA目前主要研究包括长链非编码RNA和微小RNA,长链非编码
RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)通过多种机制发挥其生物学功能, 这些机制包括基因印记、染色质重塑、细胞周期调控、剪接调控、mRNA 降解和翻译调控等。lncRNA 通过这些作用机制在不同水平进行基因表达调控;而微小RNA(microRNA,miRNA)是一种长度约21-23nt的非编码RNA,成熟的miRNA主要作用是对基因转录后水平进行负向调节,通过引起其靶mRNA的降解或翻译过程的中断而参与细胞增殖、凋亡、免疫、神经内分泌以及干细胞分化等众多生命过程。总之,它们不再被认为是不能编码蛋白质的垃圾RNA,而研究非编码RNA对了解基因调控、基因敲除、人类疾病防治及生物进化探索等都具有重要意义。
microRNA检测流程--高通量荧光定量PCR法
启因生物利用荧光定量PCR的方法,建立了人/鼠microRNA检测的数据库,目前能提供500多种microRNA检测;并且开发了microRNA检测芯片,提供microRNA大规模筛选检测技术服务。
附:microRNA qPCR芯片(肿瘤芯片,96孔板)
microRNA qPCR芯片(384孔板芯片)
详细介绍: