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Real time PCR芯片技术服务
广州诺特生物采用Qiagen公司RT2 Profiler qPCR Array System,可在一次实验中准确定量检测某条信号通路或者与某种疾病相关的上百个基因的mRNA水平。
服务类别:芯片与生物信息学总访问:489
最后更新:2014-10-31半年访问:5
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该技术克服了实时定量PCR检测基因表达工作量大、耗时久的缺点,将基因芯片的检测精度提高到了与实时定量PCR相当的水平。 qPCR Array技术服务主要实验步骤如下: 1 客户样品RNA抽提 a) 若实验对象为组织样品,取适量(50-100mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml的RNA抽提试剂Trizol,匀浆后抽提RNA。 b) 若实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,完全吸去培养液后加1ml的RNA抽提试剂Trizol,裂解后抽提RNA。 2 RNA质量检测 a) 紫外吸收测定法测定RNA在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,以计算其浓度并评估RNA纯度。 b) 使用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳,检测RNA纯度及完整性。 3 cDNA模板制备 按照逆转录酶使用说明将样品RNA逆转录为cDNA。 4 实时定量PCR 根据说明将cDNA模板适当稀释后加入到实时定量PCR反应混合液中,然后在含有基因特异性引物的96孔板各孔中加入等量反应液,进行实时定量PCR反应。 5 数据处理:利用仪器配套软件计算各张PCR芯片中的每个基因的Ct值。最后,采用△△Ct方法比较相应基因的表达量变化。 提供实验报告 :包括详细的实验方法及实时荧光定量PCR芯片实验结果及相关图表。 更多相关技术资料,欢迎来电咨询!
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