免疫沉淀(IP):
免疫沉淀是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与Protein A/G或二抗偶联的agaose或Sepharose beads孵育,通过离心得到beads-protein A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经洗涤后,重悬于电泳上样缓冲液,煮沸5-10 min,在高温及还原剂的作用下,抗原与抗体解离,离心收集上清,上清中包括目的蛋白和少量的杂蛋白。
免疫沉淀实验用途非常广泛,而且基于最基本的免疫沉淀实验衍生出了许多免疫沉淀相关实验手段(比如免疫共沉淀、染色质免疫沉淀)。
IP实验对抗体质量要求颇高,而且完备的实验设计是成功的基础,科佰生物有非常丰富的IP经验,会帮助客户严格设计实验,提高成功率。
免疫沉淀:
原理: IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“proreinA"特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的proreinA预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。
实验流程:
1. 细胞裂解;
2. 总蛋白定量;
3. 去除非特异性结合蛋白;
4. 加入抗体和Preotein A/G agarose beads孵育;
5. 洗脱。
6. WB检测沉淀下来的目的蛋白(可选,更外收费)。
样品要求:
1. 客户需提供待检测样品、免疫沉淀用抗体(也可由我们代购);
2. 待检测样品可以是直接的待检测蛋白样品,也可以是细胞、组织或细菌样品,但需收取蛋白抽提费用。样本收集后应立即-20度保存,若长期保存应-80度保存;
3. 免疫沉淀常尽量提供未经冻存的新鲜蛋白样品。
免疫共沉淀:
原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
实验流程:
1. 细胞裂解;
2. 总蛋白定量;
3. 去除非特异性结合蛋白;
4. 加入蛋白X的抗体和Preotein A/G agarose beads孵育;
5. 洗脱。
6. WB检测蛋白Y。
样品要求:
1. 客户需提供待检测样品、免疫沉淀用抗体和WB检测用抗体(抗体也可由我们代购);
2. 待检测样品可以是直接的待检测蛋白样品,也可以是细胞、组织或细菌样品,但需收取蛋白抽提费用。样本收集后应立即-20度保存,若长期保存应-80度保存;
3. 免疫沉淀常尽量提供未经冻存的新鲜蛋白样品。
订购方法:
1、询价及订购请填写"询价单",并发送邮件至sales@cobioer.com
2、根据客户信息,我们会上门取样品
3、如需帮助,请发送邮件至tech@cobioer.com或拨打025-86880024,科佰生物的技术支持将竭诚为您服务。
bio-equip.com
科佰生物科技有限公司是一家专业提供生命科学研究服务外包,生物试剂、耗材销售的综合型公司。公司在多年的发展历程中,逐步建立起分子生物学、蛋白工程、病毒包装、抗体工程、细胞工程、药物研发等一系列平台,与上海张江药谷、苏州纳米园建立了稳定的合作关系,同时公司与国内外知名产品供应商签署贸易协议,成为一线品牌的代理商、经销商。
为节约客户的时间,提升科研服务的质量,公司出资筹建现货产品库,包括ORF库、载体库、抗体库、细胞库、病毒库,已经建成1000+的ORF库,全部经过测序验证;80+载体库,全部经过实验验证;300+抗体库,全部经过预实验验证;200+细胞库,全部来源于ATCC/ECACC等正规机构;100+的病毒库,全部现货可用。
公司拥有全球领先的硬件设备,包括荧光定量PCR仪、流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、高通量筛选仪、高内涵筛选仪、液体工作站、HPLC、质谱、akata、超速离心机、冷冻离心机、多款多功能酶标仪、洗板机、生物安全柜、CO2培养箱等等,基于如此强大的平台,充分保证了科研数据的质量,进而保证了论文的质量。
公司的团队主要由国内外知名大学毕业的硕士、博士组成,具备化学、生物学、医学、药学等相关专业背景,大部份员工有多年在CRO公司或者国内外药企工作的经验,具有更专业的生命科学背景和更强烈的客户服务意识。
公司秉承“客户第一”的理念,旨在全力为客户排忧解难,与客户发展长期的合作关系,做到让客户满意,做到公司利益和客户利益相统一。同时公司重视人才培养,除了专业能力的不断培养外,更重要的是培养员工的使命感及开拓创新精神,只有有主人翁意识的员工,只有不断创新的员工,公司才能生存,才能发展。
公司立足现有的技术优势、客户优势、成本优势,通过公司全体员工的一致努力,立志成为一流的科研外包服务企业和自主专利研发产品的生产企业,进而能在药物研发上有所建树。
技术服务列表:
1.分子生物学:基因合成、引物合成、基因测序、核酸提取、载体构建、质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、定点突变、定点整合、定点敲除、甲基化检测、SNP检测等等
2.蛋白工程:原核、酵母、昆虫、哺乳动物蛋白表达系统
3.病毒包装:腺病毒、慢病毒
4.抗体工程:WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal、磁珠分选、病理染色
5.细胞工程:细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术、细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)
6.药物研发:GPCR、Kinase、Protease、Ionchannel、Nuclearreceptor
7.数据统计与分析
8.论文翻译与润色
产品列表:
1.代理、经销国内外一线品牌产品
2.自主研发专利产品