ELISA检测

ELISA检测： 
ELISA检测的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

科佰生物经过不断地优化和改进，积累了大量的经验，拥有了一支具有一流人才的团队，公司提供间接法ELISA、夹心法ELISA、竞争法ELISA。

间接法ELISA检测：用特异性抗原包被固相载体，加入待测的抗体样品反应后，再加入酶标二抗，经底物显色后测定。间接法ELISA需要客户提供待检测样本和包被用的抗原。

实验流程:

1. 将抗原吸附于固相载体表面；

2. 加待检抗体，形成抗原-抗体复合物；

3. 加酶标抗体（抗抗体）；

4. 加入底物；

5. 结果判定：有色产物的生成量＝抗体量。

样品要求:

1. 客户需提供待检测抗体（也可由我们代购）和包被用抗原。；

2. 检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆时，样本收集后应立即-20度保存，若长期保存应-80度保存；

3.样本量的要求：若一个指标做复孔检测应不少于250ul，做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足最好提供500ul以上。

夹心法ELISA检测：用第一抗原或抗体包被固相载体，加入待测的抗体或抗原反应后，再加入酶标的第二抗原或抗体，经底物显色后测定，即可计算出待测抗原的量。此方法所用抗原一般为大分子抗原，如蛋白等，不适用于多肽等半抗原。夹心法ELISA需要客户提供待检测标本和成对抗原或抗体（亦可由我们购买或制备抗体）。 

实验流程:

1. 将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质；

2. 加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时问，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物；

3. 加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合；

4. 加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。

样品要求:

1. 客户需提供待检测抗体（也可由我们代购）和包被用抗原。；

2. 检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆时，样本收集后应立即-20度保存，若长期保存应-80度保存；

3.样本量的要求：若一个指标做复孔检测应不少于250ul，做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足最好提供500ul以上。

竞争法ELISA检测：用特异性抗体包被固相载体，同时加入酶标抗原和待测抗原的混合物样本，待测抗原将与酶标抗原竞争与固相上抗体结合。经底物显色后测定，计算两组数值之差即可推出待测抗原的量。此方法常用于测定小分子抗原。竞争法ELISA需要客户提供待检测标本、包被抗体和酶标抗原（亦可由我们购买或制备抗原或抗体）。 

实验流程:

1. 将抗体吸附在固相载体表面；

2. 加入酶标抗原和待测抗原；

3. 加入底物；

4. 结果判定：对照孔与样品孔有色产物的生成量的差与未知抗原的量成负相关。

样品要求:

1. 客户需提供待检测抗体（也可由我们代购）和包被用抗原。；

2. 检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆时，样本收集后应立即-20度保存，若长期保存应-80度保存；

3.样本量的要求：若一个指标做复孔检测应不少于250ul，做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足最好提供500ul以上。

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7.数据统计与分析
8.论文翻译与润色
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