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基因敲除与基因敲除小鼠

基因敲除与基因敲除小鼠


knockout & knockout mouse
基因敲除,是建立在基因同源重组技术以及胚胎干细胞技术基础上的一种新分子生物学技术。
服务类别:转基因总访问:2119
最后更新:2014-2-18半年访问:19
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基因敲除与基因敲除小鼠
 
所谓“基因敲除小鼠、基因敲除模式小鼠“,就是先在小鼠的胚胎干细胞上通过基因重组的办法进行基因修饰——将胚胎干细胞中的靶向基因改掉,然后将“修饰”后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎,生成嵌合体小鼠-基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠。这种嵌合体小鼠——基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠长大后,体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。当小鼠的生殖细胞恰巧被“修饰”过了,则它们就会生出基因完全被“修饰”过的基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠。

服务流程

A. 打靶载体构建:(1-2个月)

包括:基因结构分析、筛选策略设计、探针设计/构建和证实、打靶载体构建(体内重组工程)、核实(同源臂、Neo原件盒、报告基因)、制备电转用DNASouthern杂交探针设计和优化。

B. ES细胞培养和电转(2-3周)

   包括ES细胞的培养和将打靶载体电转进ES细胞。

C. 阳性克隆的分离和筛选(3-5周)

包括通过PCRsouthern杂交对抗生素抗性ES细胞和阳性ES细胞的筛选。

D. 阳性ES细胞扩大培养和显微注射(2-3个月)

   包括将阳性ES细胞显微注射/转移到囊胚中,将囊胚植入代孕母鼠,以及嵌合体小鼠的出生

E.  繁殖嵌合体小鼠并得到F1代小鼠,通过基因型检测确认得到杂合子(2-3 月)

F. 运输所有课题相关材料,包括一笼(不少于2只)F1杂合子小鼠和所有阳性重组胚胎干细胞(1-2月)。

需要您提供的信息

您只需告诉我们基因名字和您的特殊要求。如果您没有相关的经验,我们会免费为您提供咨询,根据您的需求为您提供最佳的设计方案。

我们给您的终产品

不少于两只的F1杂合子小鼠以及相关实验数据。我们会提供给您相关的检测方法和最终检测报告,您也可以自己进行核实检测,也可以在我们的帮助之下完成。

服务说明

在您的课题进行过程中,我们会每两个周为您发送一次课题进展汇报,内容包括课题进展的每一步结果(包括电泳图、PCR结果、酶切结果和杂交结果等),让您清楚的了解自己课题的进展情况,就如同自己的学生在做lab meeting 一样。

 

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