实时荧光定量PCR全面解决方案

realtime fluores-cence quantitative PCR

BIOTREE提供实时荧光定量PCR全面解决方案，全程与您沟通或帮您设计实验,我们为您完成所有的实验操作，提供完整的实验报告和数据分析报告。

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一、技术路线

样品收集

样品DNA提取

特异性引物设计、特异性探针设计

引物合成、探针合成

荧光定量PCR检测

样品质量检测

数据分析

样品RNA提取

反转录

二、技术方法

2.1 样本基因组提取

2.1.1 RNA提取

所需样本量：细胞（≥10⁶）、组织（≥300mg）、血液（≥1ml）、血清（≥1.5ml）等样品材料，总RNA（≥20μl，浓度≥ 50ng/μl）。

样本保存：组织样本请保存在-80ºC或保存在Trizol中（液氮研磨后）或保存在RNAlater中（动物组织）

样品运输：用冻存管保存，并用干冰或液氮运输。

2.1.2 DNA提取

所需样本量：细胞（≥10⁶）、组织（≥300mg）、血液（≥2ml）、血清（≥1.5ml）等样品材料，总DNA（≥20μl，浓度≥ 50ng/μl）；

样本保存：组织样本请保存在-80ºC；

样品运输：用冻存管保存，并用干冰或液氮运输。

2.1.2样本质量检测

如果客户给的样本是已提取好的总RNA样本，需满足以下条件：

完整性：1.2%琼脂糖凝胶电泳出现两条带（28s、18s RNA），其中28s RNA条带的亮度是18s RNA条带亮度的1.5~2.0倍，否则说明RNA出现了降解。如果出现弥散片状或者条带缺失，则说明RNA样本出现严重降解，说明样本不可用；

纯度：OD260/OD280在1.8~2.1之间，比值最好为2.0（保存液为pH=7.0 的RNase free ddH2O）。DNA 应该去除干净；

浓度：最低浓度不低于200ng/μl，每个样品总量不少于10μg；

保存条件：要溶解在H₂0或TE (pH 8.0)，用冻存管保存，并用干冰或液氮运输;。

注：建议在条件允许情况下，提供可供两次样品制备的量，以确保实验质量及延续性。

售后服务

售后服务包括：技术服务、数据处理和分析服务。
可关注我司微信公众号：阿趣代谢，查看相关技术答疑。

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