全自动培养皿分装仪应用案例：生活饮用水菌落总数检验

根据国家标准,生活饮用水菌落总数标准限值为100CFU/mL。CFU是指菌落形成单位,也就是在一定的培养条件下,能够生长出来的细菌数量。这个标准限值是指在每毫升的水中,菌落总数不能超过100个。本方案利用微生物法及自动菌落计数仪达到快速检测出生活饮用水中的菌落总数。
 
方案详情：

• 实验原理

通过1mL水样在营养琼脂培养基上、在有氧条件下36℃士1℃培养48h后,所得1mL水样中的菌落总数的方法。
二、实验准备
1、仪器和设备
①  高压蒸汽灭菌器
②  培养箱：36℃±1℃
③  电炉
④  电子天平
⑤  冰箱
⑥  菌落计数仪（SK,PSF1100或PSF2200）
⑦  PH计或精密PH试纸
⑧ 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）FDT-SP01001
⑨ 无菌吸管：10 mL（具0.1 mL刻度）FDT-SP01010
⑩ 手动移液器：fluidot  1 mL  MSP1K
⑪ 吸头：1.5mL   FDT-1500-1-TSF
⑫ 灭菌平皿：fluidot  FDT-9CM-2-S，直径90 mm。
⑬ 全自动培养皿分装仪：fluidot  FDT-MF80
⑭ 采样瓶
2、培养基和试剂
① 营养琼脂培养基
 
 
三、实验步骤
1、以无菌操作方法用手动移液器吸取1ml,充分混匀的水样,注入无菌平皿中,通过全自动培养皿分装仪(fluidot, FDT-MF80)自动倾注约15mL营养琼脂培养基,仪器自动前后左右旋摇平皿,使水样与培养基充分混匀。
 
2、待冷却凝固后,翻转平皿,使底面向上,置于36℃士1℃培养箱内培养48 h+2h,进行菌落计数,即为1ml水样中的菌落总数。
 
四、菌落计数方法
1、在自动菌落计数仪上按照表一的数值，设置好条件。
2、使用自动菌落计数仪，快速识别重叠或模糊的菌落，1-3秒出结果后保存，继续识别其它的培养皿，直到所有培养皿计算完毕。
 
五、结果报告
1、选择平均菌落数在 30~300之间者进行计算,若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围则将该菌落数乘以稀释倍数报告结果(见表1中实例1)。
2、若有两个稀释度,其生长的菌落数均在 30~300之间,则视两者之比值来决定,若其比值小于2,应报告两者的平均数(如表1中实例2)。若大于或等于2,则报告其中稀释度较小的菌落总数(如表1中实例3和实例4)。
3、若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告结果(见表1中实例5)。
4、若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告结果(见表1中实例6)。
5、若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告结果(见表1中实例7)。
6、若所有稀释度的平板上均无菌落生长,则以未检出报告结果。
7、如果所有平板上都菌落密布,不要用“多不可计”报告,而应在稀释度最大的平板上,任意计数其中2个平板1cm'中的菌落数,除2求出每平方厘米内平均菌落数,乘以皿底面积63.6cm',再乘其稀释倍数报告结果。
8、菌落计数的报告:菌落数在100以内时按实有数报告,大于100时,采用两位有效数字,在两位有效数字后面的数值,以四舍五人方法计算,为了缩短数字后面零的个数也可用10的指数来表示(见表 1)。
 
9、以CFU/g 为单位报告。