Edman 降解法：蛋白质和小肽的N-末端氨基酸序列测定技术

Edman 降解法是一种用于确定小肽和蛋白质的N-末端氨基酸序列的方法。这种方法是基于周期性地移除肽链N-末端的氨基酸并检测该氨基酸的身份。这个过程可以重复进行，从而连续地确定多个氨基酸的顺序。

Edman降解的大致步骤如下：

1.肽键选择性标记：

首先，样品与Edman试剂（酚酞异硫氰酸）反应，这会特异性地与肽的N-末端氨基酸形成一个环状酞酰化衍生物。

2.酞酰化衍生物的裂解：

经过酞酰化后，酞酰化氨基酸可以通过温和的酸性条件（如三氟醋酸）从肽链上释放出来，而不破坏肽链上的其它氨基酸。

3.氨基酸检测：

释放的酞酰化氨基酸可以通过色谱法进行分离和检测，从而确定其身份。

4.重复过程：

剩余的肽再次与Edman试剂反应，释放下一个N-末端的氨基酸，如此反复进行。

图1

虽然这个方法在确定小肽的序列上很有用，但它有一些局限性。其中最大的局限性是它在降解过程中会出现效率损失，这通常使得连续降解超过15-20个氨基酸变得困难。对于较大的蛋白质，通常需要将其分解为较小的片段，然后对这些片段进行Edman降解。

近年来，由于质谱技术的进步，质谱成为了蛋白质序列和鉴定的主要工具，但在某些情境下，Edman降解仍然是一个有用的补充方法。