24小时长效培养PBMC保障细胞高活性

一、PBMC细胞简介
 
外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有单个核的细胞，来源于骨髓中的造血干细胞（HSC），通常主要包括淋巴细胞和单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其他细胞不同，红细胞和多核白细胞的比重在1.092左右，单个核细胞的比重为1.075-1.090，血小板为1.030-1.035。因此利用一种介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，可将各种血细胞与单个核细胞分离。 淋巴细胞又包括T淋巴细胞，B淋巴细胞和NK细胞。其中T淋巴细胞是比例最多的淋巴细胞类型，在胸腺中发育成熟，主要功能就是执行人体的细胞免疫功能，在人体的免疫监视中发挥着重要的作用。B淋巴细胞属于人体的执行体液免疫功能的细胞，B淋巴细胞受抗原刺激以后，能够发育成熟为浆细胞，可以分泌各种抗体，发挥体液免疫功能NK细胞是人体非特异性免疫细胞，也在免疫监视中发挥着重要作用。单核细胞属于白细胞的一种，从血液中逸出到组织中就变成了吞噬细胞，也称为巨噬细胞，在人体的非特异性免疫功能中发挥着重要的作用。
二、PBMC细胞应用
 
PBMC是免疫系统的关键组成部分，因此在免疫学、传染病、恶性肿瘤、疫苗研发、移植治疗、个性化医学和毒理学领域均作为最基础的试验原料被广泛应用。例如在肿瘤免疫药物研发中常用于抗体依赖性细胞毒性（ADCC）、T细胞激活或抑制、CMV Recall、Treg抑制及PBMC构建人源化小鼠等体外试验，也可用作PBMC-肿瘤细胞共培养，突破免疫体外杀伤研究的壁垒。
 
以ADCC试验为例，PBMC在其中起主要作用。抗体依赖性细胞毒性试验，是依靠抗体介导杀伤细胞来杀伤靶细胞。具体过程可理解为：抗体的Fab段结合在靶细胞抗原表位上。抗体的Fc段与NK细胞（因NK细胞是能发挥ADCC作用的主要细胞，故以此举例）表面的FcR结合，从而NK细胞活化，穿孔素、颗粒酶被释放。穿孔素、颗粒酶从靶细胞膜上形成的“孔道”进入胞内，通过激活凋亡相关的酶使靶细胞凋亡。在以上过程中，为了使效应细胞释放的细胞毒物质充分作用于靶细胞，良好的效应细胞（如新鲜的PBMC）供给在ADCC的研究中是必不可少的。另外，ADCC也常用来评估药物研发中抗体的活性有无及强弱，因此一个高质量的PBMC产品用作效应细胞尤为重要。
 
三、相关评估
 
技术人员以0和24时培养为检测点，测定不同种属下的细胞活率，结果表明经长时培养后，细胞活率仍可达到75%以上，极好地满足客户需求。
   
多种属PBMC均经过流式细胞仪利用特定抗体对T细胞和B细胞内细胞组分进行占比评估，方便客户直观地了解常见细胞占比。
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