稳定转染细胞株的构建原理及服务流程

原理：稳定转染，就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。


 
应用：
 
适用场景包括基础研究（基因功能研究）、药物筛选（CAR开发前期scFV筛选）等，满足多样化实验需求。
 
过表达稳转细胞系构建服务流程：
 
1）基因合成：您需提供：宿主细胞信息、靶基因的NM号或者靶序列。
 
2）载体构建和质粒生产：将靶基因构建入适当载体并小量制备。
 
3）慢病毒包装及生产：采用慢病毒系统构建，基因整合稳定。
 
4）慢病毒转导及克隆筛选：有限稀释法进行单个细胞克隆筛选。
 
5）细胞系鉴定。
 
6）交付产品。
 
 
CHO细胞稳定株构建服务流程：
 
1）基因合成：您需提供：宿主细胞信息、靶基因的NM号或者靶序列。
 
2）签订技术服务合同，收取预付款
 
3）瞬转表达评估 (CHO稳定株开发)。
 
4）稳定细胞株构建和筛选。
 
5）提供稳定细胞株。
 
6）蛋白大量表达和纯化 (可选)。
 
7）交付产品并收取尾款。