醛缩酶的特性及测定方法

醛缩酶是裂解酶的一种，狭义的指催化裂解1.6-二磷酸-D-果糖生成3-磷酸-D-甘油醛与α-二羟丙酮磷酸反应的酶（同时在糖异生中也可催化这个反应的逆反应），即指1.6-二磷酸-D-果糖醛缩酶（Ec 4.1.2.13）。（广义的指催化同形式反应的酶，例如亦有将鼠李糖磷酸醛缩酶等统称为醛缩酶）。

一、概况
1、反应式
测定温度为30℃，最适pH为7.0。
2.米氏常数
3.专一性
酵母醛缩酶对果糖-1,6-二磷酸具有高度的专一性，但是，此酶与L-山梨糖-1,6-二磷酸反应速度仅为果糖-1,6-二磷酸反应速度的30%。
4.抑制剂
醛缩酶的抑制剂有 Cu2+，Zn2+，Ag+和邻-苯菲绕啉。
5.纯度要求
所需纯度最低限度为9单位/毫克，所含的D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶与L-甘油-3-磷酸脱氢酶应分别小于0.01%与0.05%。
6.意义
醛缩酶可用来测定果糖-1,6-二磷酸。血清中醛缩酶对于肌病是一项关键性的诊断试验，并且对于心肌梗塞、肝病和急性精神病等病也有用处。
7.稳定性
此酶以3.2MpH7.6的硫酸铵悬浮液保存在4℃下，其稳定期可达6个月之久。pH 值小于4.5，则使此酶发生不可逆变性。
二、测定方法
1.反应式
经Jagannathan等改进的反应式：
可在240nm处跟踪吸光率的增量。一个单位即定为在规定的条件下温度为25℃，每分钟能使吸光率增量变化为1.00时所需的活性。
2.偶联法
按反应式(5)在340nm处测量吸光率的减量,并由此可计算出酶活性。活性(以毫单位/毫升醛缩酶表示)即等于吸光率差值ΔA(10分钟)x129(于37℃)。