石蜡制片与冷冻制片的实验步骤及高效得到高质量冰冻切片的方法介绍
组织学设备是免疫组化实验的必备设备，而免疫组化的常用切片主要包括石蜡切片和冰冻切片两种。
石蜡制片的步骤：
取材→脱水（固定、脱水、透明、浸蜡）→石蜡包埋→切片→染色、封片→镜下观察。
这里涉及到的常用基础组织学设备有：脱水机、包埋剂、石蜡切片机、染色机、封片机、显微镜等。
冷冻制片的步骤：
取材→冷冻包埋→切片→染色（手动也行）→镜下观察。
必须用到的基础组织学设备有：速冻仪、冷冻切片机、显微镜。
免疫组化有哪些痛点？免疫组化实验根据样本类型、抗体类型、切片要求等条件的不同，对应免疫组化要求也不同。同时石蜡切片在免疫组化实验中制片步骤繁琐，组织前处理要求高，可能破坏抗原，需要做抗原修复；而冰冻切片能够较好地保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。想要避开抗原修复这一步骤，免疫组化切片时可以选择冰冻切片。冰冻切片虽然无需抗原修复，但在免疫组化时常常会遇到：
- 细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构；
- 切片厚度也较石蜡的厚，会直接影响切片质量；
- 如果冷冻切片机箱体制冷不足，就需要使用速冻仪辅助冷冻包埋组织。
如何高效得到高质量冰冻切片？
瑞沃德冷冻切片机用于免疫组化实验冷冻切片时，可解决以上所有难题 ：
1、缓解片子偏厚问题
▲图：瑞沃德冰冻切片机切片实拍图
- 压缩机冷量输出大可做二次温控补偿；PID控温，使得箱体温度在一定范围内波动且可以自动恢复；
- 顶/级十字交叉导轨搭配五相高分辨率步进电机、精密丝杆和水平进样滑块，组成高精准进样系统；
- 以上两点保证切片无需设置过厚就能切出满足需求的片子。
2、缓解冰晶产生的压力
▲瑞沃德冰冻切片机可开启快冷功能
冰晶主要产生于样本冷冻包埋阶段，因为冷冻过程缓慢从而产生冰晶，这就要求设备的冷冻效果要满足样本速冻需求。瑞沃德冷冻切片机速冻台最低温度可达-42℃，快速制冷点温度最低可达-60℃，满足速冻需求，同时箱体和样本头均可单独制冷，从而减少冰晶产生，保证切片质量。
3、运维成本低
瑞沃德冷冻切片机具备2个半导体快速制冷点和15个常规制冷点，满足任务量大的应用场景，同时速冻台制冷效果达到行业国际标准，达到速冻包埋效果，无需使用速冻仪包埋。冷冻包埋成本更低。同时具备操作日志记录，可及时有效开展切片工作复盘，优化切片条件，提高切片质量。
4、自动切片考虑到一些新技术老师开展免疫组化实验，对冷冻切片机不熟悉，无法掌握切片条件导致出现切片质量问题。瑞沃德冷冻切片机具备自动切片功能，设置好切片条件，开启自动切片，保证切片质量高且稳定同时，更加贴合新人的实验场景，保证实验高效开展
