饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的测定

霉菌毒素，又称为真菌毒素，是霉菌或真菌在食品或饲料里生长过程中产生的次生代谢产物，目前在自然界中已发现的霉菌毒素有300多种。

其中黄曲霉毒素（AFT）、玉米赤霉烯酮（ZEN）和 T-2毒素等，广泛存在于饲料及植物性饲料原料中，严重危害畜禽产品的质量安全。

霉菌毒素通过食物链被人体摄入后，会导致肝脏损害，超过一定量后会致癌、致畸并诱发免疫系统疾病。因此，精准快速地检测饲料及饲料原料和食品中毒素含量，对于保证食品安全具有重要的意义。
 

Copure®多功能净化柱/货号：COAF226

本实验参考标准NY/T 2071-2011，对样品进行提取，采用226多功能净化柱进行净化处理，建立了液相色谱-串联质谱检测饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的方法。

该方法操作简单快速，通过低、中、高三水平加标实验验证，回收率稳定，能满足日常检测需求，供参考。
 

一、样品提取

称取5.0 g试样于50 mL离心管中，加入25 mL乙腈-水溶液（84:16），涡旋混匀3 min，置于超声波清洗器提取20 min，中间振荡2~3次，取出，于10000 r/min离心5 min，待净化用。

biocomma® 多管涡旋混匀仪/货号：SDC-3000-D

二、样品净化
1) 向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。
2) 将 biocomma Copure® 226多功能净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端。
3) 将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样瓶或EP管中。
4) 取5 mL净化提取液，氮气吹干，用1 mL 20% 乙腈溶液复溶，涡旋超声溶解残渣，过0.22 μm微孔滤膜，上机分析。

样品瓶

针式过滤柱

三、标曲配制

将同种类基质空白样品按样品提取和样品净化步骤进行提取、净化，分别吸取一定量的混合标准溶液，添加到空白样品净化提取液中。

混匀后，同样品置于氮吹仪45 ℃下吹干，用1 mL 20% 乙腈溶液复溶，配制成上机浓度分别为2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL。
 

四、仪器条件

液相部分

色谱柱：Commasil® BEH T-C18

(2.1 mm×100 mm,3 μm)

流动相：A：5 mmol/L乙酸铵溶液  

B：甲醇（含0.1%甲酸）

流速：0.3 mL/min   柱温：30℃   

进样量：5 μL   洗脱程序：见表1
 

表1 梯度洗脱程序
 

质谱条件

离子源：HESI     

扫描方式：正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI- ）

鞘气压力：30 arb    辅气压力：8 arb    

离子传输管：300 ℃    辅气温度：350 ℃

表2 组分名称、及特征离子一览表（*为定量离子）

五、实验结果

测试数据
 

表3 加标回收率结果

测试色谱图

六、订购信息