干细胞是指具有无限分裂增长能力,可以进行自我更新,并能在不同诱导条件下,分化成不同类型的细胞的一种特殊生物细胞。比如我们常见的骨髓干细胞胚胎干细胞,广泛应用于免疫系统疾病治疗,内分泌系统疾病治疗等。细胞培养技术中利用生物反应器进行干细胞的体外培养,使干细胞大量增殖量产,已成为3D干细胞扩培的主流手段。
一、干细胞的培养方法
干细胞的培养方法主要有两种,一种是2D培养,另一种是3D立体培养。
2D培养多采用贴壁培养技术,在培养瓶或培养皿等容器中加入细胞生长所必须的营养物质,在特定的培养环境下,细胞贴附于培养器皿壁上,分裂生长,形成致密的细胞层的细胞培养方式。由于这种培养只在平面进行增殖生长所以也成为2D 培养。
细胞的2D培养技术简单,对于培养液的更换也相对容易,不需要完整的过滤系统所以 适用于较多大多数动物细胞。但是它的缺点是:细胞的扩大培养较难,投资大,且不能及时有效地监测细胞生长状态和细胞生长环境。
为了实现细胞规模化扩增,半个世纪以来,生命科学领域逐渐使用新型的生物反应器来实现细胞的规模扩增,比如采用微载体生物反应器来扩增培养CHO细胞、成肌细胞等。利用悬浮细胞培养生物反应器进行昆虫细胞,红细胞的规模化扩增等。