人elisa进口试剂盒操作程序要求

人elisa进口试剂盒原理：
   
采用竞争法测定金黄地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平。用金黄地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板，制成固相载体，实验时依次在微孔板中加入标本及标准品，并加入HRP标记的OXLDL抗体，标本及标准品中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。反复洗涤后加底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再用硫酸终止反应，转变成黄色。标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，颜色越浅。颜色的深浅和样品中的OXLDL含量呈负相关。采用酶标仪在450nm波长测定吸光度（OD值），根据标准曲线，计算测试样品中OXLDL浓度。

人elisa进口试剂盒 操作程序：
   
1. 弃去液体，甩干，每孔加满稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。如此重复5次，拍干。
    2. 每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。。
    3. 取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
   
4.测定：以空白孔调零，在450nm波长下测量各孔的吸光度值（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
   
5.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的，其实际浓度应该乘以总稀释倍数。