鲑鱼胰岛素样生长因子ELISA试剂盒步骤和处理方法。
浏览次数:190 发布日期:2020-8-7
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一:操作步骤:
1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3、样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次 (也可用洗板机洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
二:处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量
(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议 500万细菌或细胞加入 1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声 3s,间隔10s,重复30 次)8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。