激光全息细胞成像及分析系统应用于乳腺癌的迁移运动分析

近年来，我国乳腺癌的发病率呈持续增高的趋势，在某些发达城市，乳腺癌在女性恶性肿瘤中已位居首位，根据雌激素受体的ER的类型是呈现激素非依赖性和依赖性，研究ER对乳腺癌的发病机制，临床治疗和预后判断，有着重要的意义。

ER是乳腺癌重要的生物学标志物，在乳腺的发育生长过程中受体内雌激素和孕激素的调控，ER是乳腺细胞中的雌激素受体，癌症发生时，对于阳性ER的患者可以通过内分泌的治疗达到70-80%的效果，而对于阴性ER患者的治疗效果还不到10%，表明阴性ER患者已经完全脱离激素的调控。本研究中，主要对阴性ER乳腺癌细胞侵入淋巴细胞探究ERα对乳腺癌淋巴转移过程中的相关关系，

实验材料：

以MCF-7乳腺癌细胞株为实验材料，使用基因编辑技术处理后的Cas9-ERα,基质金属蛋白酶抑制剂MG6001处理的后的Cas9-ERα+ERα,以及 Cas9-vinculin，使用瑞典的HoloMonitor M4进行拍摄细胞的运动和迁移，观察4小时，每2min拍摄一次。对比不同实验组的细胞迁移运动情况。

实验结果,对比于对照组发现Cas9-ERα的细胞迁移性明显增高，并分别捕捉到细胞变形过程中的五种不同形态，（文章补充材料中1-5movie）。并且在Cas9-ERa+MG6001该实验组中金属蛋白酶抑制剂并没有能抑制细胞缺少ERα后的高侵袭性。并分析了五种不同形态的细胞百分比。Cas9-vinculin的细胞迁移及细胞运动速率同样明显高于对照组，同时也观察到可细胞变形过程中的五种不同形态，（文章补充材料中6-10movie）。综合文章数据表明了在乳腺癌细胞中，ERα的缺失会导致黏着斑蛋白（Vinculin）的表达量下降会直接导致细胞内的肌球蛋白轻链p-MLC的增加，从而导致细胞的侵袭性增加。

HoloMonitor M4 非标记，活细胞成像及分析系统，实时追踪细胞的运动过程及分析细胞运动轨迹和运动速率，实时高效地提供给科研工作者更多数据及分析结果