单克隆抗体的生产

产生针对特定抗原的大量靶向抗体的过程。单克隆抗体是通过称为杂交瘤的特定细胞的多个/相同拷贝产生的。为了产生杂交瘤细胞，需要将2个细胞融合，以便将2个细胞的特征结合到1个细胞中。其中一种细胞是生产细胞抗体，它是来自实验室小鼠的B淋巴细胞，另一种是肿瘤细胞，称为骨髓瘤。肿瘤细胞具有无限生长的能力，并且以超过正常细胞生长的速度生长。Laboratroy生产的杂交瘤细胞比正常的抗体生产细胞复制快得多，并且单个杂交瘤无限期地生产特异性抗体。

杂交瘤细胞产生初由B淋巴细胞产生的特异性单克隆抗体。原始B淋巴细胞将产生单克隆抗体，这取决于在收获B淋巴细胞之前注射入小鼠的抗原种类。一个小例子是，如果给老鼠注射某种病毒，老鼠体内的B淋巴细胞会产生特定的病毒抗体。与肿瘤细胞融合产生杂交瘤，导致产生针对特定病毒的单克隆抗体。

杂交瘤细胞被置于能帮助它们生长并产生大量单克隆抗体的培养基中。培养单克隆抗体有两种方法，一种是在实验室烧瓶中培养，即体外培养，另一种是在小鼠的胃壁中培养。将杂交瘤注射到小鼠体内是获取单克隆抗体的常见方法。该方法通过将来自用所需抗原免疫的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞混合来完成。骨髓瘤细胞需要失去合成HGPRT酶(次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶)的能力，该酶使细胞能够利用细胞外的次黄嘌呤源作为前体来合成嘌呤。细胞有另一种合成嘌呤的途径，因此缺乏HGPRT对细胞来说不是问题，但当细胞暴露于氨基蝶呤时，它们不能利用这种其他途径，完全依赖HGPRT生存。总而言之，未融合的骨髓瘤细胞不能生长，因为它们缺乏HGPRT，未融合的正常脾细胞也不能生长，因为它们的寿命有限。杂交瘤细胞无限生长，因为脾细胞伴侣提供HGPRT，而骨髓瘤伴侣是永生的。

步是将细胞融合混合物转移到含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和嘧啶胸苷的HAT培养基中。2钕步是检测每种培养物的上清液，以确定产生所需抗体的位置。必须从每个抗体阳性培养物中分离出单细胞，并对其进行传代培养，这代表其抗体是单克隆的克隆。每个单细胞培养物分泌一种特定类型的抗体，该抗体针对特定的决定簇/选择的抗原。3注册营养师步是扩大成功克隆的培养规模。杂交瘤培养物可以在体外培养容器中无限生长，产量为15-65 g/ml，在体内使用小鼠，血清中的抗体浓度为0.5-15 mg/ml。在过去的几年里，世界范围内的动物福利活动家正试图限制使用老鼠来生产单克隆抗体。当单克隆抗体产生时，它可以用作探针来追踪、结合和纯化诱导其形成的特定蛋白质。

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