SRSV (Small round structured Virus) 小圆结构病毒的离心分离

SRSV会导致食物中毒，症状：腹泻，呕吐，发烧等

设备：1. 通用台式或立式高速冷冻离心机（有15ml 角转头及1.5ml 微量转头）
          2. 超速离心机：Hitachi CS150GXL微量超速离心机S52ST甩平转头，4×5mlPA管，或落地式超速离心机CP70MX，日立P40ST转头，6×13ml薄壁PA管或P65ST转头，4×5ml薄壁PA管，
分离步骤：
1．病毒性肠炎病人粪便或感染病毒的动物、水产品的组织1g－2g，加10ml 纯水放入15ml PP管
2．4000xg，4℃离心30分
3．去沉淀，上清液加入HCFC141b搅拌2分钟
4．2000xg，4℃离心30分
5．去沉淀，上清液用于超速离心。
6．1.2ml，30％（w/w） 蔗糖液置于5ml 管下部，上部用（5）上清液加至距管口3mm（约3.6ml）或其他容量离心管按比例配置梯度液和样品
7．超速离心纯化：35,000rpm－38,000rpm (RCFmax约12,470xg－147,000xg)，4℃，4－3小时，加速“5”，减速“7”
8．超速离心后移去上清液及30％蔗糖液，小心地吸去沉淀上部残液（注意不要触及沉淀！）
9．沉淀加36ul 纯水用石蜡封口，直立4℃冰箱中保存过夜。
10．次日，取出，振荡30分钟，移入1.5ml eppendorf 管
11．高速离心机15000rpm ，4℃，30分
12．病毒在上清液中。可取1—2ul 上清液负染后上透射电镜观察（100KV，×40000）SRSV为小球形，直径约20—30nm。