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高效生物防腐剂

浏览次数:11900 发布日期:2004-5-25 
PROCLIN系列防腐剂

为解决生物样本处理过程中保存期短的问题,SUPELCO公司推出新一代高效生物防腐剂ProClin150,200,300,5000,可以有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长。当浓度达到0.02%条件下,ProClinâ 系列防腐剂具有广谱抗菌活性,能在比较长的时间内抑制细菌、真菌和酵母菌等微生物的生长;同时,它又能保持体系中酶的活性,因此它是一种理想的可替代硫汞撒、叠氮化钠和庆大霉素等生物防腐剂。

ProClinâ 系列防腐剂的优点:

  • 广谱抗菌性,作用速度快;良好的与酶的相容性,不会影响与酶或抗体的相关反应。
  • 使用剂量少,6-20ppm的ProClin300即可达到抑菌的目的。
  • pH适用范围广(pH2-8.5*),化学稳定性好。经实验室检测,在25度下保存2年,该防腐剂的活性组分仅损失3%。
  • 毒性远低于同类产品硫汞撒。
  • 与水可以任意比混合。

ProClin5000使用范围pH 2-12

ProClinâ 系列防腐剂作用原理:

ProClinâ 系列防腐剂的活性成分主要是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)。这两种成分抑制细胞的生长以及促使细胞凋亡的原理相同。活性成分在与细胞膜接触几分钟后,立即可以渗透到膜内并抑制细胞内酶的活性(见图1)。目标酶处于细胞代谢KREBS循环的中心位置,ProClinâ 系列防腐剂作用KREBS循环的四个不同位置(见图2):丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase),a -酮戊二酸脱氢酶(ketoglutarate dehydrogenase),琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)和NADH脱氢酶(NADH dehydrogenase)。从而抑制细胞生长代谢,大分子的合成,引起细胞内能量水平迅速下降。由于能量体系的崩溃,细胞不能合成日常代谢所需要的化合物。

所有的细菌及真菌至少拥有部分KREBS循环,所以ProClinâ 系列防腐剂的适用的范围非常广泛。其次,ProClinâ 系列防腐剂具有多标靶作用位点,因此大大降低了因变异产生的微生物的耐药性。随着KREBS循环被阻断,细胞产生能量(以合成ATP为标志,见图3)和合成酶等生物活性物质的能力迅速下降,但其使用剂量却保持比较低的水平对人畜无害。

 

ProClin 系列防腐剂性能:

  1. ProClin 系列防腐剂对诊断试剂影响:
  2. 验数据表明,ProClin 系列防腐剂不会对诊断试剂中的关键酶与底物的结合速率产生影响,比如:辣根过氧化酶(HRP),碱性磷酸酶(AP)。

    4. 250ppmProClin300HRP(AP)与底物结合速率的影响

    短期效应

    即使ProClin300的使用浓度超过推荐浓度15倍时,其短期内对于HRP和AP的Km和Vmax 无影响(见表1)。

     

    表1.ProClin300对HRP和AP的Vmax的影响

     

     

    Km(Mm)

    Vmax(ΔA/min/mg prrotein)

    辣根过氧化酶(HRP)

    6.9

    904

    +15ppm ProClin300

    6.8

    861

    辣根过氧化酶(HRP)

    7.9

    520

    +250ppm ProClin300

    8.3

    525

    碱性磷酸酶(AP)

    0.69

    138

    +15ppm ProClin300

    0.56

    131

    碱性磷酸酶(AP)

    1.40

    153

    +250ppm ProClin300

    1.20

    142

     

    长期效应

    长期使用ProClin 300同样不会对酶(例如:HRP和AP,见图5)的活性产生影响。

    5. 4(37)ProClinAP (HRP)活性的影响

     

  3. ProClin系列防腐剂对抗体结合的影响

在推荐使用浓度下,ProClin â 系列防腐剂不会对抗体的结合产生影响。通过研究ProClin 300对经纯化过小鼠IgM抗原与联结HRP的抗-小鼠IgM抗体之间结合的影响,表明浓度在300ppm以下,ProClin 300不会对其产生影响(见图6)。50ppm的ProClin 300保存上述抗体35天同样无影响。

6. ProClin300对连接HRP的抗体影响

ProClin系列防腐剂的参数

 

ProClin150

ProClin200

ProClin300

ProClin5000

成份

活性成份1

1.5%

1.5%

3.0%

50%2

基质

丙烯基乙二醇

二丙烯基乙二醇

稳定剂

23-25%镁盐

3%镁盐

烷基羧酸盐

推荐使用浓度

采用原液稀释的浓度(%)

0.04-0.1

0.04-0.1

0.02-0.05

0.01-0.03

保存期

3年

3年

3年

18月3

应用

体外诊断试剂盒,校正液,对照液,有机试剂的保存

仅ProClin5000推荐使用在血清基质液的保存

1 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮

2 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮

3 数据在收集中


2006年02月08日

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来源:上海天运实验器材科技有限公司
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