从引进小鼠到繁育过程的详细攻略介绍及注意事项

很多同学在课题进展到一定状态后，都会需要小鼠来开展后续实验。但面对着珍贵实验鼠鼠时，新晋铲屎官们常常手足无措，无从下手。小鼠状态越来越差不说，甚至出现断种的情况。

既然想要成为一个合格的铲屎官，就该尽早做好准备。今天鼠博士就给大家讲述引进小鼠时需考虑的几大问题。建议每个新晋铲屎官都收藏一下~
 

• 明确小鼠背景：常见近交系小鼠品系有C57BL/6（毛色为黑色） 、BALB/c（毛色为白色）、FVB（毛色为白色）、ICR（毛色为白色）等

• 明确小鼠类型：小鼠为野生型小鼠、无菌鼠还是基因编辑小鼠，小鼠免疫系统是否健全等。

确定小鼠饲养环境：

• 询问小鼠来源机构（实验室/供应商）小鼠合适饲养环境。根据国务院批准的《实验动物管理条例》，按照相应的微生物控制标准，实验动物分为四级：一级，普通级动物 conventional (CV) animal；二级，清洁级动物clean (CL) animal；三级，无特定病原体级动物specific pathogen free (SPF) animal；四级，无菌级动物germ free (GF) animal。

• 确认小鼠合适饲养环境后，联系动物房/动物中心询问相应等级小鼠如何引进，按照不同单位各自流程办理引入外来小鼠流程。

• 根据引入小鼠类型与数量，提前准备好合适的笼位数

水和食物的供应：

• 根据小鼠与实验需求，准备好合适的饲料与水。

• 饲料：常规小鼠使用常规生长繁殖饲料即可（脂肪含量为6％），其他特殊情况视情况而定。饲料需灭菌，灭菌方式可选择高温高压灭菌、辐照灭菌等。

• 饮用水：可使用pH2.5-3.0的酸化水、高压无菌水、纯化水等。

 

引进小鼠时：
确定小鼠基本信息：

• 了解小鼠编号标记的方法，便于准确辨认小鼠：
  (1) 断趾编号法：断趾法是最常见的编号方法，根据对新生小鼠前肢 4 趾，后肢 5 趾的切断位置来进行编号。
  (2) 耳标法：用专门的耳孔机在小鼠耳朵上打孔或造成缺口，或者用剪刀在耳朵边缘剪出不同的缺口进行编号。
  (3) 染色法：用毛笔或棉签蘸取化学药品，在实验动物体表不同部位涂上斑点，以示不同编号。常用染液有：3–5% 的苦味酸溶液（黄色）；0.5% 的中性品红溶液（红色）；2% 的硝酸银溶液（咖啡色）。

• 检测小鼠编号、数量、性别、周龄、基因型等基本信息是否与标签相符。

观察小鼠基本情况：

• 皮毛：有无光泽、竖毛、出血、污物、脱毛。
• 眼：有无分泌物、流泪、白内障、角膜损伤。
• 口腔：有无流涎、出血。
• 耳：有无外伤、耳壳曲折、耳部炎症。
• 四肢：有无外伤、弯曲、脱臼、肿胀、关节炎症。
• 肛门：有无排泄残留物、血便、脱肛。
• 精神和食欲：沉默、倦怠、动作不活泼、食欲不振、拒食。
• 营养状况：消瘦、过度肥胖、成长异常。
• 姿势和步态：姿势异常、行走和站立困难、运动失调、跛行。

稳定小鼠状态：

• 小鼠在引入后需经过环境适应期3-5天后，方可进行实验操作。
• 尽量减少噪音、振动、气味干扰，辅助小鼠尽快适应新环境。

复核小鼠基因型

• 询问小鼠来源机构（实验室/供应商）小鼠基因型具体检测方案，购买相应试剂
• 将引进小鼠剪尾，复核基因型，明确小鼠信息，同时检验基因检测方案是否可行。

引进小鼠后：
明确目前实验需求

• 需要快速使用小鼠进行实验（订购野生型、动物造模模型或大量单一基因型小鼠）
• 需要大量获得某种基因型小鼠，小鼠处于被积极使用状态。（订购繁殖对自行繁殖）
• 需要维持品系但不扩大其规模，小鼠处于维持状态。

设计繁育策略并制定种群管理计划

• 向小鼠来源机构（实验室/供应商）了解小鼠繁育特征。小鼠的基本繁育信息可见下表：

• 繁育策略设定：根据基因小鼠的类型，参考下面方式，制定繁育笼配繁策略。

（更详细的繁育攻略，可阅读往期推文：【小鼠大学问】养小鼠你要知道的那些事（三）：基因工程小鼠繁育方案）

• 种群管理计划制定：根据实验小鼠是被积极使用状态还是维持状态制定繁育笼数

若小鼠是被积极使用状态，尽量使目标基因型的比率保持在 1/8 (12.5%) 或更高，并且根据小鼠所需数量，结合怀孕率、 产仔数、 性别、基因偏差等因素计算出所需笼位数。

若小鼠是维持状态，保持至少两代小鼠，每代包括两到三对姐妹兄弟的繁殖。在新一代的小鼠被证明有生育能力之前，不要淘汰任何年老繁殖对。并且需要密切监测繁育性能。除此之外，可考虑对实验所用小鼠品系进行冷冻保存，便于保存遗传特性，避免育种失败等问题发生。

小鼠繁育Tips：
根据繁育策略建立好繁育笼后，还是会出现各种各样的问题影响小鼠繁育，遇到问题时可参考下表进行改善：

记录种群信息：
开始饲养小鼠后，小鼠的信息记录对于种群管理非常重要，主要在于笼卡与饲养记录表。

• 笼卡分为饲养笼与繁殖笼，两者包含信息见下表：

参考如下

 

• 饲养记录：

除了笼卡以外，我们还要用表格把所有的小鼠情况汇总记录下来，可以包括小鼠的编号、出生日期、代次、性别、基因型信息、亲代小鼠信息、交配日期、目前状态、体重信息等等，便于统计与管理。

小鼠基因型鉴定
小鼠基因组鉴定也是常常困扰新晋铲屎官的点，鼠博士这边的建议是，首先按照小鼠来源机构（实验室/供应商）小鼠基因型具体检测方案来执行，若还有一些问题，可以参考下表进行改进。

希望这篇文章可以对新晋铲屎官的你能有所帮助，不用走太多弯路！如果您还有这方面的疑问，随时欢迎您联系我们！

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上海南方模式生物科技股份有限公司（Shanghai Model Organisms Center, Inc.，简称"南模生物"），成立于2000年9月，是一家上交所科创板上市高科技生物公司（股票代码：688265），始终以编辑基因、解码生命为己任，专注于模式生物领域，打造了以基因修饰动物模型研发为核心，涵盖多物种模型构建、饲养繁育、表型分析、药物临床前评价等多个技术平台，致力于为全球高校、科研院所、制药企业等客户提供全方位、一体化的基因修饰动物模型产品解决方案。