肿瘤免疫之细胞疗法浅谈及Countstar Rigel细胞计数分析在其中的应用
一、细胞疗法的主要类型：
1、CAR-T细胞疗法
CAR-T细胞，全称为嵌合抗原受体T细胞，是一种通过基因工程产生人工T细胞受体的T细胞。从人体中提取T细胞后，对其进行基因改造使之能表达CAR，CAR使T细胞具有靶向特定蛋白的能力，这种表达CAR的T细胞输注入患者体内后，能直接与肿瘤表面的特异性抗原相结合而被激活，然后开始增值并产生细胞毒性，从而更有效地靶向和消灭癌细胞。提取的T细胞既可以来自患者自身血液中的T细胞（自体），也可以来自其他健康供体的T细胞（异体）。
目前，从全球细胞治疗的开发来看，CAR-T细胞治疗持续占据主要地位，其在全球范围内已获批准或正在研发的细胞治疗中占比超过五成，超过其余细胞疗法类型的总和。而基于CAR-T细胞展现出的强大临床疗效，CAR-T细胞疗法管线仍然在逐年大幅上涨。当然，CAR-T细胞治疗也面临着诸多挑战，主要有严重的细胞毒性，实体瘤内的限制运转、浸润和激活，相对欠缺的体内持久性，大规模生产制造和商业化问题，高昂的成本和价格问题。未来，CAR-T细胞治疗或将聚焦于解决大规模生产制造和商业供应、价格与支付模式、以及更安全的疗效、更多适应症和瘤种的突破。由此，CAR-T细胞疗法才能真正造福人类。
2、TCR-T细胞疗法
TCR-T，即T细胞受体工程化T细胞治疗，是一种新型的过继细胞疗法，主要利用基因编辑技术，将能特异性识别肿瘤抗原的T细胞受体（TCR）基因导入患者T细胞内，使其外源性表达TCR，从而具有特异性杀伤肿瘤细胞的活性。CAR-T和TCR-T都属于经基因工程技术改造的T细胞疗法，其中CAR-T是通过识别肿瘤细胞表面抗原靶点而发挥作用，目前仅被批准用于白血病、淋巴瘤等少数肿瘤，对治疗实体瘤效果不佳。相比之下，TCR-T能够识别肿瘤内外多种抗原靶点，可广泛用于治疗包括实体瘤在内的多种恶性肿瘤。
3、NK细胞疗法
NK细胞，即自然杀伤细胞，其在人体的先天免疫系统中起着重要作用。作为人体先天免疫的一部分，能对身体内遇到的各种病原体迅速做出反应，是抵御危险感染或异常细胞的第一道防线，是身体对抗癌症的正常储备。
目前，各种提高NK细胞效应功能的途径已经被开发。主要有经基因修饰的NK细胞，例如，CAR-NK细胞等。此类经基因修饰过的NK细胞可在免疫细胞治疗实体瘤方面起到重要作用。
4、TIL细胞疗法
TIL全称肿瘤浸润淋巴细胞。该疗法首先需要对患者的肿瘤组织进行基因测序，找到特定的基因突变，然后从肿瘤组织中筛选出能特异性识别基因突变癌细胞的淋巴细胞，然后在体外对这些特殊的淋巴细胞进行扩增，最终再回输到患者体内。
TIL细胞疗法目前面临的挑战主要是抗肿瘤作用周期短，只能针对部分肿瘤（黑色素瘤等），TIL细胞制备过程复杂，且对活性细胞数量要求高，以百千亿计（远高于CAR-T的1亿）。但是，由于TIL细胞来源于患者肿瘤组织，本身便具有更强的靶向肿瘤细胞的能力，因此，相对于CAR-T/TCR-T细胞，TIL细胞不需要经工程化技术将CAR/TCR转入T细胞，本身便具有特异性靶向肿瘤细胞的能力。此大大降低了治疗成本，也是TIL细胞疗法独特的优势。
5、巨噬细胞疗法
与其他CAR细胞疗法中使用的细胞类型不同，巨噬细胞在免疫抑制性微环境中更容易浸润肿瘤，是先天性免疫的关键效应细胞，具有强大的吞噬作用；可以作为抗原呈递细胞，启动患者自身的适应性免疫系统。尤其是经过基因工程改造的嵌合抗原受体巨噬细胞（CAR-M），其在治疗实体瘤的应用中有显著疗效。
二、Countstar Rigel在细胞治疗中的应用
1、AO/PI双荧光计数法对细胞浓度和活率的检测
从采集样本，到病人回输和留样检测，对细胞浓度计数、大小和活率检测，CountstarRigel AO/PI双荧光染色法可得到更准确的结果。
2、符合法规要求
Countstar Rigel符合GMP要求以及FDA21 CFR Part 11法规，同时我们可以提供GMP要求的3Q验证，也可以对接或定制符合GMP要求的云端或实验室管理系统。
3、多种实验功能转染，细胞周期，细胞杀伤，CD分子检测等，与FCS软件结合分析可得到细胞图像和类流式数据。
三、总结
Countstar Rigel助力于细胞治疗行业的发展。从对目标细胞的采集、分离、改造、扩增、质控、回输，凡是涉及细胞培养的过程，都需要对细胞的密度和活率进行检测。Countstar Rigel 可全程参与细胞治疗的研发和生产。抗癌之路漫漫，Countstar愿全力以赴为你赶走这个世界的阴霾，守护生命的每一刻。
