BIOG病毒RNA提取试剂盒说明书

BIOG病毒RNA提取试剂盒说明书（中量）                                         
运输条件：常温运输               
货    号：51027-M:10次反应
          51028-M:20次反应                        
储存条件：室温（15-25℃），消化液、RNA Carrier请于-20℃存放

产品特点     
                                                   
试剂盒组成

组分	10次	20次
吸附柱和收集管	各10个	各20个
裂解液	17mL	34 mL
洗涤液A	31.5mL	63 mL
洗涤液B	13.5 mL	27 mL
洗脱液	10mL	20 mL
消化液	1.7 mL	3.4 mL
RNA Carrier	0.35mL	0.7 mL
说明书	1份	1份

产品介绍  
BIOG Virus RNA Kit是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取血清、血浆、胸腹水、脑脊液、滑膜液等病毒RNA的试剂盒。BIOG Virus RNA Kit采用了最新的优质进口离子膜，裂解液和洗脱液经过多次优化，能高效地分离微量病毒RNA。提取得到的病毒RNA较其它品牌的同类试剂盒产量更大，纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。
操作步骤

• 请自行准备：无水乙醇、1.5mL离心管。
• 取出洗涤液，按以下操作：

a) 洗涤液A：31.5mL加入13.5mL无水乙醇；63mL加入27mL无水乙醇。
b) 洗涤液B：13.5mL加入31.5mL无水乙醇；27mL加入63mL无水乙醇。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

• 取15mL离心管，加入1500μL样本，30μLRNA Carrier混合均匀，加入1500μL 裂解液及150μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。
• 加入6000μL无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。
• 将吸附柱放入收集管内，将4590μL上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，5,000 rpm 离心2分钟，弃收集管内废液；
• 将吸附柱放回收集管内，将剩余4590μL溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。
• 将吸附柱放回收集管内，加3750μL 洗涤液A至吸附柱内，5,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
• 将吸附柱放回收集管内，加3750μL 洗涤液B至吸附柱内，5,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
• 将吸附柱放回收集管内，5,000 rpm 离心2 分钟，离去残留的洗涤液。
• 取出吸附柱，放入新的15 mL 离心管内，加入250-400μL 洗脱液，静置3 分钟，5,000 rpm离心3 分钟，收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步实验或-20℃保存。如需浓缩核酸，则可继续进行后续步骤。
• 于洗脱液中加入800ul无水乙醇，轻轻颠倒混匀，5,000 rpm 离心5分钟，弃上清。
• 开盖室温放置5min，待乙醇挥发后，加入30-50ul洗脱液溶解核酸。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

建议样本量和加入试剂盒试剂组分比例：

样本量	RNA Carrier	消化液	裂解液	无水乙醇	洗涤液A	洗涤液B
1ml	20ul	100ul	1000ul	4000ul	2500ul	2500ul
1.5ml	30ul	150ul	1500ul	6000ul	3750ul	3750ul

注意事项：
裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。