SRM靶向蛋白质组学检测技术的原理和步骤

SRM（Selected Reaction Monitoring，选择反应监测）是一种质谱技术，主要用于目标蛋白质或肽段的定量分析。SRM通常使用三重四极杆质谱仪（triple quadrupole mass spectrometer）进行操作，并且是一种高度敏感且特异性强的技术。

以下是SRM靶向蛋白质组学检测的一些基本原理和步骤：

1、目标选择：在实验开始前，首先需要选择希望测量的目标蛋白质或肽段。

2、肽段选择：为了检测蛋白质，通常会选择代表性的肽段（通常被称为“肽图”或“签名肽”）来进行定量。

3、转化为预定的离子：样品在质谱仪中被电离，并且在第一个四极杆中选择预设的前体离子（precursor ion）。

4、碎裂：选定的前体离子在碰撞细胞中与惰性气体碰撞，产生碎片离子。

5、检测特定碎片离子：在第二个四极杆中，特定的碎片离子被选择并检测。这一步提供了SRM的高度特异性。

6、定量：通过测量特定肽段的特定离子的强度，可以定量目标蛋白质在样品中的丰度。

图1. 平行反应监测（PRM）

由于SRM的高度特异性和灵敏度，它已经成为临床研究和生物标志物验证中的一个重要工具。与传统的非靶向质谱蛋白质组学技术相比，SRM提供了更高的定量准确性，尤其是在低丰度蛋白质的情况下。