关于适体（Aptamer）筛选技术的相关问题介绍

1.核酸适配体相对于抗体有何优势？

        适配体的筛选周期短、工作浓度低、批次差异性小、放大工艺简单、成本低、稳定易保存，并且可以常温运输，适合于毒素和低免疫原性抗原。

2. 磁珠方法筛选适配体，磁珠是一起加入到PCR体系中吗？对PCR的有什么影响吗？

        一个简单的判断是如果加到PCR mix中，肉眼不可见磁珠的颜色，影响应该是不大的，如果磁珠的量过多，肉眼可以看到mix中浑浊的颜色，那样会对PCR过程产生抑制。

3. 一开始没有什么引物二聚体，忽然从中间几轮开始引物二聚体特别多，连初始文库PCR出来，引物二聚体也是比较多，不知道错在哪里了？

        有可能后来出现了气溶胶污染。

4. 核酸适配体有动力学特点吗，比如高亲和力的反应速率比低亲和力的反应快？
       
         有这个特点。但是筛选中要注意的是第一轮筛选的时候，基本都是单拷贝，即使是高亲和力的也不一定保留下来，因为低亲和力的还是更多的。所以第一轮筛选建议是尽量孵育时间长一点，让能结合的尽量能结合并保留下来。

5. SELEX的难点在哪里？
       
         主要是难在后期的鉴定。获得文库之后并不代表实验已经成功，还需要从文库当中去找到真正能够结合的单一序列。从测序、分析、挑选系列到合成，再到后面的鉴定要重复验证，而这个过程是非常的漫长，并且后期的成本高于前期成本。

6. 按照做抗体的方法做核酸适配体的应用为什么行不通？

         核酸适配体结合到表面之后，它的构象会发生改变，而这种变化就会导致它不能够再像在溶液中一样正确识别靶标分子。核酸适配体的结构的柔性比蛋白质更大，更容易发生结构的变化。

7. 核酸适配体与靶标相互作用的作用力是什么？

        适配体可以形成多种结构形状，例如发夹，凸起，假结和G-四链体。它们可通过氢键，静电相互作用，疏水作用，π-π堆积，范德华力，或这些不同的力的组合与靶分子发生相互作用。