利用冷冻研磨仪提取破碎胃癌细胞蛋白做WB

WB，蛋白质印迹(Western blotting)又称免疫印迹(immunoblotting)，是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。通过抗原抗体反应对目标蛋白的表达进行半定量检测，还可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后续分析。WB作为一种方便可靠的研究工具，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面，将与质谱和蛋白质芯片等技术一起在蛋白质组时代发挥重要作用。

目前科研人的 WB 现状就是干货都懂，实验状况却频出。辛辛苦苦花时间制备的细胞却遇到提取液检测不到目的蛋白、目的蛋白信号弱 、转膜效率低 、显色或曝光后无条带 、Western blot背景高且不均匀、非特异性条带、条带拖尾或变形等常见的问题。众所周知，有效的样品制备是影响 WB 实验可重复性的重要因素。贵州医科大学分子重点实验室就使用上海净信冷冻研磨仪制备了人体胃癌细胞样品提取蛋白做WB实验。

实验样品：人体胃癌细胞；

实验器材：冷冻研磨仪JXFSTPRP-CLN、研磨管、氧化锆珠若干；

实验步骤：

1.细胞沉淀，加缓冲液，提取液，离心重悬；

2.加入氧化锆珠，与细胞沉淀物的比例1:1；

3.设置研磨参数，启动。

实验效果图：

研磨前（未加研磨珠-加研磨珠-研磨后)

附：实验仪器图片净信冷冻研磨仪JXFSTPRP-CLN

上海净信JXFSTPRP-CLN冷冻研磨仪是一种快速、高效、制冷的研磨系

统。它能在非常短的时间内将土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真

菌、孢子、古生物标本等样品完成研磨、粉碎、混合机细胞破壁。广泛应用于生命科学、医药、生化、环境、地质、农业、林业、质检、材料等领域。