流式细胞术FCM在染色体倍性分析上的优势及实验步骤介绍

倍性育种，指通过改变染色体的数量，产生不同的变异个体，进而选择优良变异个体培育新品种。正常的配子细胞中所包含的染色体数或半数的体细胞染色体数称为一套单倍染色体，用符号n 表示。具有一个染色体组的细胞和由这样的细胞组成的个体称为单倍体(n) ，具有两个染色体组的细胞或个体称为二倍体（2n），具有两个以上整套染色体组的细胞或个体则称为多倍体，包括三倍体（3n）、四倍体（4n）等。

传统的倍性鉴定主要采用常规压片法统计染色体数目，但采用这种方法很难寻找到分裂中期染色体分散良好并可进行计数的细胞，而且整个过程耗时长，检测效率低。采用流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）进行倍性分析的方法简化了倍性分析的过程，可以快速准确检测同一物种范围内不同倍性的样品。FCM作为一项快速、高效的检测技术，被广泛应用于细胞分类学、植物遗传学及植物生理学等研究领域中。FCM常被用于鉴定植物倍性水平，通过检测植株G0/G1峰的细胞核DNA含量可以判断出植物的倍性。

实验原理
首先需要裂解液将组织中细胞核释放出来，并打开DNA链，然后用DAPI染液将细胞核DNA上的A-T
碱基对特异性染色，再用仪器检测出被染色的A-T碱基对发出的荧光强度。比如二倍体的荧光强度是100（横坐标），那么单倍体的荧光强度就是50（横坐标）。纵坐标是细胞数量的显示，通常来说，信号峰高说明信号比较好，杂质少。