科研elisa试剂盒收集方法
浏览次数:153 发布日期:2021-3-11
来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
科研elisa试剂盒操作细节:
1、实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数,标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
2、在储存和温育时避免强光直接照射。
3、不管是进口elisa试剂盒,还是其它产品,在使用之前都要仔细阅读说明书,同时确定试剂盒是不是在有效期内。
4、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
5、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
6、选择抗体时醉好选择一个单抗和一个多抗进行配对,若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体,醉好从同一家公司选择抗体。
7、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
8、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
9、按说明书将所用进口elisa试剂盒平衡至室温,配制所需试剂盒,DIY夹心法ELISA常见技术指南。
科研elisa试剂盒收集方法:
1、不抗凝收集血清
(1)无添加剂的干燥空管收集
血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂(硅油)。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,离心使用。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学检测。亦可直接用干燥EP管收集全血,充分静置使得红细胞充分自然凝固后,离心分离出血清待用或保存。
(2)用促凝管收集
采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅油,同时添加了促凝剂。促凝剂能激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变成不可溶性的纤维蛋白聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块,如果想快点出结果,可采用促凝管。一般静置半小时到1小时,直接离心分离出血清待用或保存,常用于急诊生化。
(3)含有分离胶及促凝剂的采血管收集
管壁经过硅化处理,并涂有促凝剂可加速血液的凝固,缩短检验时间。管内加有分离胶,分离胶与PET管具有很好的亲和性,确实起到隔离作用,一般即使在普通离心机上,分离胶能将血液中的液体成分(血清)和固体成分(血细胞)彻底分开并积聚在试管中形成屏障。离心后血清中不产生油滴,主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。