小鼠Elisa试剂盒样本处理与注意事项
浏览次数:158 发布日期:2021-1-5
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小鼠Elisa试剂盒实验原理:
小鼠Elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
小鼠Elisa试剂盒样本处理:
1、:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分,仔细收集上清,保存中如出现沉淀,应再次离心。
2、:应根据标本的要求选择edta、---钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分,仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分,仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分,仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分,仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞上清:检测性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分,仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分,仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右2000-3000转/分,仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
小鼠Elisa试剂盒注意事项:
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应小鼠Elisa试剂盒的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。