小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒操作步骤
小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒实验原理：
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠转化生长因子β1（TGF-β1）抗体水平。用纯化的小鼠转化生长因子β1（TGF-β1）抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子β1（TGF-β1）抗体，再与HRP标记的TGF-β1抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1（TGF-β1）抗体呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠转化生长因子β1（TGF-β1）抗体浓度。
小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠转化生长因子β1（TGF-β1）抗体水平。用纯化的小鼠转化生长因子β1（TGF-β1）抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子β1（TGF-β1）抗体，再与HRP标记的TGF-β1抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1（TGF-β1）抗体呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠转化生长因子β1（TGF-β1）抗体浓度。
小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 120pg/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 60pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 30pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 15pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 7.5pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
