新冠病毒研究用水系列三：如何获得完美的核酸电泳条带

什么是核酸电泳？
核酸电泳是基因操作的核心技术之一，用于分离、鉴定DNA、RNA 分子混合物和纯化DNA片段。
核酸电泳最让大家头疼的问题 - 异常条带
核酸电泳实验中，常常会遇到条带模糊、拖尾、扭曲等现象，究其原因，除了操作不当，电泳条件未优化，电泳缓冲液也是重要的影响因素之一。电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。  

• 缓冲液离子强度低，电导率小，导致DNA迁移缓慢；如果多次使用，离子强度降低，PH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。
• 缓冲液离子强度高，则电导率高并明显产热，严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。

   

常见问题	原因	解决方法
条带模糊	核酸降解	使用不含核酸酶的超纯水配置缓冲液
	电泳缓冲液陈旧	建议经常更换缓冲液
	有蛋白污染	使用低有机物的超纯水配置缓冲液
	核酸变性	使用超纯水或者缓冲液稀释样品
条带黯淡	核酸浓度过低	增加上样量
	核酸降解	使用不含核酸酶的超纯水配置缓冲液
	条带被示踪染料掩盖	提高上样量；避免使用与目的片段迁移率相同的示踪染料
拖带或涂抹带	PCR体系或PCR程序不合适	优化PCR体系和PCR程序
条带扭曲	配胶的缓冲液和电泳缓冲液不同	配胶和电泳中使用同一批缓冲液
	电泳时电压过高	控制电泳时电压不超过6V/CM

核酸电泳用纯水要求
为了防止水中杂质（如：核酸酶、蛋白质、离子等）对电泳结果的影响，核酸电泳实验配置缓冲溶液或稀释样品需要使用超纯水：

• 电阻率 18.2 MΩ·cm
• TOC < 10 ppb
• 无核酸酶和蛋白酶
• 细菌总数< 1 CFU/mL
• 热原< 0.005 EU/mL
• 0.22μm 或更低的颗粒过滤

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关于乐枫生物
    乐枫生物(Rephile Bioscience，Ltd.) 是一家专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品研发、设计和制造的企业，为高科技生物技术和生命科学领域的用户服务。乐枫公司着眼于全球发展，在中国、美国、法国、印度、南非等近20个国家建立了销售机构，同时也为国际大型公司提供OEM和ODM，产品销往包括欧美的近100个国家。成立十余年，乐枫持续投入研发，创立出了自己的产品品牌RephiLe（瑞枫），推出了多个新概念产品- 无线连接的Genie系列纯水系统和智能型大流量纯水工作站Super-Genie等。目前乐枫纯化柱填料配方齐全，也提供多款密理博纯水系统的兼容耗材。 
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